背景[1-3]
2,4-二氯苯氧基乙酸（2,4-D）是用于控制闊葉雜草的常見內(nèi)吸性除草劑。它是世界上使用最廣泛的除草劑，在北美使用次數(shù)最多的是第三種。2,4-D也是重要的合成植物生長(zhǎng)素，通常用于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行植物研究，并作為植物細(xì)胞培養(yǎng)基（例如MS培養(yǎng)基）的補(bǔ)充。2,4-D是合成植物生長(zhǎng)素，是一類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。它通過葉子吸收，并轉(zhuǎn)移到植物的分生組織中。隨之而來的是不受控制的，不可持續(xù)的生長(zhǎng)，導(dǎo)致莖卷曲，葉片枯萎并最終導(dǎo)致植物死亡。2,4-D通常以胺鹽的形式使用，但也存在更有效的酯版本。2，4-D在低濃度（10一50ppm）下，有防止落花落果、提高座果率、促進(jìn)果實(shí)生長(zhǎng)、提早成熟、增加產(chǎn)量的作用。
應(yīng)用[4][5]
用于2,4-二氯苯氧乙酸免疫學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)研究
2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是一種常用的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和除草劑,并被廣泛用于水果品質(zhì)的提高及保鮮時(shí)間的延長(zhǎng),但由于其不易降解造成了在自然界的大量殘留,對(duì)我們的生態(tài)環(huán)境和人體健康造成了嚴(yán)重的危害。2,4-二氯苯氧乙酸可以通過皮膚和呼吸系統(tǒng)進(jìn)入體內(nèi),具有潛在的致癌性及致突變性,能刺激人體分泌大量的雌性激素,干擾內(nèi)分泌系統(tǒng),對(duì)生殖和免疫系統(tǒng)可產(chǎn)生不良的影響。除此之外,2,4-二氯苯氧乙酸還能使血紅細(xì)胞聚集,阻礙紅細(xì)胞的攜氧能力,損傷肌肉、肝臟、腎臟和腦組織,還會(huì)對(duì)我們的眼睛、皮膚和粘膜有損害。
制備出人工抗原2,4-D-BSA和2,4-D-OVA,并用2,4-二氯苯氧乙酸人工免疫抗原免疫BALB/c純系小鼠,得到特異性的多克隆抗體,并運(yùn)用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備了單克隆抗體,組裝了2,4-二氯苯氧乙酸間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒并對(duì)其性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下：1.2,4-二氯苯氧乙酸人工抗原的制備及鑒定采用碳化二亞胺法(EDC法)將2,4-二氯苯氧乙酸與牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶聯(lián),合成免疫原2,4-D-BSA和包被原2,4-D-OVA,采用紫外掃描(UV)和聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)法進(jìn)行鑒定；用2,4-二氯苯氧乙酸人工免疫抗原(2,4-D-BSA)免疫BALB/c純系小鼠,通過間接ELISA測(cè)定小鼠多抗血清效價(jià)、阻斷ELISA鑒定其抑制。
結(jié)果表明：BSA與2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)后,波峰出現(xiàn)右移,表明偶聯(lián)成功；SDS-PAGE電泳中BSA的泳動(dòng)速度大于2,4-D-BSA表明2,4-二氯苯氧乙酸已與BSA成功偶聯(lián)；6只小鼠血清效價(jià)均達(dá)到了1：1.28x104,且1號(hào)小鼠多抗血清敏感性,半數(shù)抑制IC50為72.48ng/mL,表明成功獲得了高效價(jià)、特異性好、親和力較高的鼠源抗2,4-二氯苯氧乙酸多克隆抗體血清,為2,4-二氯苯氧乙酸殘留免疫學(xué)檢測(cè)方法的建立奠定了良好的基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
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