概述^[1][2]

四烯雌酮，也叫烯丙孕素，是一種口服型活性孕激素，以類似于天然孕酮的作用模式來抑制促性腺激素的釋放。其具有19-去甲睪酮和孕酮的雙重性質(zhì)，有獨特的藥效學和藥動學性質(zhì)。與所有類固醇一樣，四烯雌酮通過自身脂溶性可以滲透入靶細胞中然后與特定受體結(jié)合來發(fā)揮作用，其類似于天然孕酮的作用模式來抑制促性腺激素的釋放，可作為家畜同期發(fā)情的藥物。

含量檢測^[3]

CN201610060735.2提供一種四烯雌酮含量的高效液相色譜(HPLC)檢測方法，具有簡便、高效、靈敏度高、分離效果好、精密度和準確度高的優(yōu)點。

采用如下的色譜條件進行檢測：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物的反相色譜柱，AgilentC18柱；流動相采用乙腈-0.01％磷酸溶液，其中，乙腈的體積分數(shù)為60％-80％(即，乙腈的體積占乙腈和0.01％磷酸溶液的總體積的60％-80％)，流速0.8-1.2ml/min；柱溫是20-40℃。

其中，色譜柱優(yōu)選的采用AgilentC18柱(4.6*250mm，5μm)和AgilentC18柱(4.6*150mm，5μm)進行試驗，更優(yōu)選AgilentC18柱(4.6*250mm，5μm)，適合的色譜柱使得被測樣品具有更好的分離效果和較短的保留時間。

其中，流動相中用0.01％磷酸溶液代替常用的水與乙腈混合使用，同時控制乙腈的體積含量，能夠很好地改善四烯雌酮的注射液在色譜檢測時造成的峰形拖尾的問題，并在較短的保留時間內(nèi)獲得較好的出峰效果，有利于檢測精度的提高。乙腈的優(yōu)選體積是70％。

其中，流速與柱溫的控制、結(jié)合上述流動相的選取，能夠使得四烯雌酮的注射液更好的分離并形成良好峰形，有利于提高檢測精度。優(yōu)選流速是1.0ml/min；優(yōu)選柱溫為30℃。

所述方法優(yōu)選的采用島津LC-20AT高效液相色譜儀，采用紫外檢測器，檢測波長為236nm，進樣量以20μl為宜。

本發(fā)明創(chuàng)造的方法具體地包括下述步驟：

S1：用乙腈配置已知四烯雌酮含量濃度的標準溶液，并采用如上所述的色譜條件進行同一色譜條件下的檢測，計算不同濃度的標準溶液在同一保留時間下的峰面積，作出獲得峰面積y關(guān)于標準溶液濃度x的標準曲線方程y＝f(x)；

S2：將待測樣品經(jīng)必要處理后獲得待測四烯雌酮樣品溶液，采用同步驟S1的液相色譜檢測條件(包括色譜條件、保留時間、進樣量等)，獲得待測四烯雌酮樣品溶液在同一保留時間下的峰面積，并根據(jù)步驟S1所獲得的標準曲線方程y＝f(x)，計算得到待測四烯雌酮樣品溶液的濃度；

S3：根據(jù)待測四烯雌酮樣品溶液的濃度獲得待測樣品的四烯雌酮含量數(shù)據(jù)。

其中，所述步驟S1中，標準曲線方程y＝f(x)的標準溶液濃度x在50-1000μg/ml范圍，即本發(fā)明能夠在較大的檢測范圍內(nèi)獲得準確可靠的檢測結(jié)果。進一步，所述標準曲線方程y＝f(x)為一元一次方程，相關(guān)系數(shù)R2≥0.99，能夠獲得擬合度很高的線性方程。

其中，所述步驟S2中，對待測樣品的必要處理可以包括對待測樣品進行一定比例的稀釋，和/或?qū)悠愤M行過濾等操作。

本發(fā)明創(chuàng)造通過HPLC、同時輔助使用紫外檢測器對四烯雌酮的含量進行測定。經(jīng)過精密度試驗、線性關(guān)系試驗和加樣回收試驗等對方法進行了驗證，結(jié)果表明該方法準確可靠，檢測范圍大，靈敏度高和準確性高。

應(yīng)用^[4]

CN201610620809.3提供一種毛驢集中受孕方法?，F(xiàn)有毛驢發(fā)情分散，排卵摸排工作量大，人工授精成功率低。為此，本發(fā)明毛驢集中受孕方法包括下述步驟：一).母驢集中發(fā)情(1).第1天選取空懷母驢若干頭，每頭母驢注射氯前列烯醇2-8mg；(2).第2天起，將四烯雌酮按每頭母驢每天8-30mg混入母驢日糧當中連續(xù)飼喂7-18天；(3).飼喂四烯雌酮的最后一天，每頭母驢注射氯前列烯醇2-8mg，同時停止飼喂四烯雌酮；二).母驢集中人工授精—停止飼喂四烯雌酮的第4-8天，對各個母驢進行人工授精，并注射Hcg1000-6000單位，隔日對母驢再進行一次人工授精。本發(fā)明具有操作簡便、受孕率高、勞動強度小的優(yōu)點，適合規(guī)?；B(yǎng)驢。

主要參考資料

[1]CN201710146675.0一種四烯雌酮的合成方法

[2][中國發(fā)明]CN201610269070.6一種四烯雌酮納米乳液及其制備方法

[3][中國發(fā)明]CN201610060735.2一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法

[4]CN201610620809.3毛驢集中受孕方法