MLN4924在結(jié)構(gòu)上與59-磷酸腺苷（AMP）相關(guān)，是NAE反應(yīng)的緊密結(jié)合產(chǎn)物。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116細胞裂解液，選擇性抑制NAE。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116細胞，抑制<9％的整體蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)。MLN4924作用于 HCT-116細胞，降低Ubc12-NEDD8硫酯和NEDD8-Cullin的結(jié)合物，這種作用存在劑量依賴性， IC50<0.1 μM，使CRL底物CDT1, p27 和 NRF2, 而不是非-CRL底物大量增加。MLN4924(3 μM)處理HCT-116細胞，在早期8小時，導(dǎo)致細胞在S期累積，在24小時的時候使含4N DNA含量的細胞具有顯著比例。 MLN4924 (3 μM) 作用于ABC DLBCL細胞，導(dǎo)致pIkappaBalpha的快速累積, 降低核p65含量, 降低核轉(zhuǎn)錄因子-kappaB (NF-kappaB) 轉(zhuǎn)錄活性, 和G(1) 期停滯, 最終導(dǎo)致誘導(dǎo)細胞凋亡,這些與有效抑制NF-kappaB 通路相一致。 MLN4924 (1 μM) 通過穩(wěn)定DNA復(fù)制因子Cdt 1，而觸發(fā)DNA的復(fù)制，且抑制細胞增殖，Cdt 1是cullins 1 和 4的一種底物。MLN4924 (1 μM) 足夠提升Cdt1長達4-5小時，足夠誘導(dǎo)DNA復(fù)制，并激活細胞凋亡和衰老途徑。MLN4924處理，誘導(dǎo)衰老表型的特性，如放大和扁平的細胞形態(tài)，證明與衰老相關(guān)的β-Gal染色陽性。MLN4924誘導(dǎo)的衰老與細胞對DNA損傷的反應(yīng)相關(guān)，DNA損傷由DNA沉默蛋白CDT1和ORC1的積累導(dǎo)致，是CRL/SCF E3s失活的結(jié)果。MLN4924誘導(dǎo)的衰老是不可逆的，伴隨著p21的持續(xù)積累，和持續(xù)激活的DNA損傷反應(yīng)。