"LLC-MK2 Adherent恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點下降，提高細(xì)胞膜對水的通透性，且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會，從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LLC-MK2 Adherent恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
LLC-MK2 Adherent恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
NCIADR.RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE 1細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞、3LL細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
Jurkat E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞、HB 611細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
LLC-MK2 Adherent恒河猴腎細(xì)胞系
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞
MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞
Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
UPCI-SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
TE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF#1細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
LLC-MK2 Adherent恒河猴腎細(xì)胞系
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
KE37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2107細(xì)胞、J111細(xì)胞、M14細(xì)胞
AR-42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC4細(xì)胞、RAEC細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞
DMS-153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HEM細(xì)胞
U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、JS1細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
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