"LLC-MK2細(xì)胞：恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開(kāi)蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候，有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過(guò)的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作步驟和注意事項(xiàng)：１.打開(kāi)無(wú)菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過(guò)多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開(kāi)各類瓶蓋前先過(guò)火，以固定灰塵;打開(kāi)的瓶口、試管口過(guò)火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái)，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開(kāi)直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開(kāi)培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
Hs 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞
U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
Daoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB-17細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
P31 FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
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