"FRhK-4 Adherent恒河猴胚腎細胞系
細胞背景資料:胚胎;腎;自發(fā)永生;雌性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FRhK-4 Adherent恒河猴胚腎細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
CT26-clone 25細胞系相關產品:MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
RAMSCs細胞系相關產品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
N1E-115細胞系相關產品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
N1E-115細胞系相關產品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
細胞生長特性:貼壁
FRhK-4 Adherent恒河猴胚腎細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數;RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數來表示單位。
MMVECs細胞系相關產品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
CF Pac1細胞系相關產品:bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
hOMF細胞系相關產品:Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關產品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
HuO9細胞系相關產品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
SUP-B15細胞系相關產品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
Jurkat 77細胞系相關產品:QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
L-363細胞系相關產品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
OUMS27細胞系相關產品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
CMT-167細胞系相關產品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
Ha Fe細胞系相關產品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
OCI/AML-3細胞系相關產品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
FRhK-4 Adherent恒河猴胚腎細胞系
WM239A細胞系相關產品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞
RMG-I細胞系相關產品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關產品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關產品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
TK-10細胞系相關產品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
HB 611細胞系相關產品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
CLL-CII細胞系相關產品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
Mahlavu細胞系相關產品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
HCPEpiC細胞系相關產品:PT-67細胞、NCIH2172細胞、C2-C12細胞
MSTO-211 H細胞系相關產品:H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
PL11細胞系相關產品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
BHP10-3細胞系相關產品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
H.Ep. #2細胞系相關產品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
HNE-3細胞系相關產品:SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
Ra #1細胞系相關產品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
T98-G細胞系相關產品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
UMUC14細胞系相關產品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產品:SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
CMT-64細胞系相關產品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
MDCK supertube細胞系相關產品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
SU-DHL-1細胞系相關產品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
CCD-1112sk細胞系相關產品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
A2058細胞系相關產品:SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
Colon 38細胞系相關產品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
HEK293EBNA細胞系相關產品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
KALS-1細胞系相關產品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
IM 9細胞系相關產品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
BT-325細胞系相關產品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
Hs695細胞系相關產品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞系相關產品:HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
RPE D407細胞系相關產品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
IPEC-J2細胞系相關產品:NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
H-2286細胞系相關產品:WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
H209細胞系相關產品:HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
HONE1細胞系相關產品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
HONE1細胞系相關產品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
F9細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
RWPE1細胞系相關產品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
MADB-106細胞系相關產品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關產品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
FRhK-4 Adherent恒河猴胚腎細胞系
EST81細胞系相關產品:HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
GC-1spg細胞系相關產品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
NE1細胞系相關產品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關產品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
OCI Ly1細胞系相關產品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
Madison lung細胞系相關產品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
7860細胞系相關產品:HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
VMCUB-1細胞系相關產品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
NCI-H929細胞系相關產品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
A375SM細胞系相關產品:PBMC細胞、Hep G2-Luc細胞、MN-9D細胞
GA-10 clone 4細胞系相關產品:P388.D1細胞、Hs-27細胞、HRIF細胞
CF Pac1細胞系相關產品:bEND.3細胞、TK10細胞、293A細胞
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