"LLC-MK2 Cell:恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
LLC-MK2 Cell:恒河猴腎細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái)，又不能太過(guò)，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來(lái)洗，洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來(lái)。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來(lái)的時(shí)候，就可以直接吹打下來(lái)，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過(guò)了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了，可以選用此方法。不過(guò)一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
LLC-MK2 Cell:恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
174xCEM.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細(xì)胞、GA10細(xì)胞、H-460細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
LLC-MK2 Cell:恒河猴腎細(xì)胞系
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細(xì)胞、87 MG細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
SNU216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、HeLa細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
HFF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、MB39細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
NCIH1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞
MHCC 97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞
KALS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH209細(xì)胞、2BS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞
KALS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH209細(xì)胞、2BS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
LLC-MK2 Cell:恒河猴腎細(xì)胞系
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
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