CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒

中文名稱：CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒

英文名稱：CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit

產(chǎn)品規(guī)格：2000次

本試劑盒是基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測和細(xì)胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測方法。基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測結(jié)果完全一致，但同時可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù)，同時如果和其它熒光探針聯(lián)用，可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。

CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式為C29H19NO11，分子量為557.47，CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時，即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)個月。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。

由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細(xì)胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強度)，分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強度)，分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過流式細(xì)胞儀檢測獲得的檢測結(jié)果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞，從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后，分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會逐漸減少直至檢測不到。

使用CFDA SE可以檢測分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測，甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測。

CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為518nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無論在體外還是體內(nèi)都不會使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會從一個細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細(xì)胞，標(biāo)記時間需自行摸索。

本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時所需的配套試劑。如果每個檢測樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml，本試劑盒共可以檢測2000個樣品。



試劑盒組份：
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管，共兩管
CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液(10X) ——————100ml/瓶，共兩瓶

注意事項：
1. CFDA SE配制成儲存液后宜在一個月內(nèi)使用完畢，最長不宜超過2個月。CFDA SE易被水解，在水溶液中會很快變質(zhì)。請在使用過程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

儲存條件：-20℃，有效期6個月。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！