??????CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒(CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit)是碧云天研發(fā)的基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測(cè)和細(xì)胞熒光示蹤的檢測(cè)試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[³H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。
??????基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測(cè)和[³H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測(cè)結(jié)果完全一致，但同時(shí)可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測(cè)可以提供整個(gè)細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù)，同時(shí)如果和其它熒光探針聯(lián)用，可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。
??????CFDA-SE的全稱(chēng)為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式為C₂₉H₁₉NO₁₁，分子量為557.47，CAS?
number為150347-59-4。CFDA?SE可以通透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA?SE后大約24小時(shí)，即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA?SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。CFDA?SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
??????由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會(huì)減弱一半，這樣通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)就可以檢測(cè)出沒(méi)有分裂的細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度)，分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度)，分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類(lèi)似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)獲得的檢測(cè)結(jié)果參考右圖。每一個(gè)峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞，從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后，分裂0次或1次等沒(méi)有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會(huì)逐漸減少直至檢測(cè)不到。
??????使用CFDA SE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。
??????目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)，也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測(cè)，甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測(cè)。
??????CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為518nm，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。
??????CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無(wú)論在體外還是體內(nèi)都不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會(huì)從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。
??????CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對(duì)于不同細(xì)胞，標(biāo)記時(shí)間需自行摸索。
??????本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時(shí)所需的配套試劑。
??????如果每個(gè)檢測(cè)樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml，本試劑盒共可以檢測(cè)2000個(gè)樣品。

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包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，半年有效。其中CFDA SE需避光保存。
注意事項(xiàng)：
??????CFDA SE配制成儲(chǔ)存液后宜在一個(gè)月內(nèi)使用完畢，最長(zhǎng)不宜超過(guò)2個(gè)月。CFDA SE易被水解，在水溶液中會(huì)很快變質(zhì)。請(qǐng)?jiān)谑褂眠^(guò)程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過(guò)程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
??????CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
??????熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?