細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
中文名稱:細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
英文名稱:CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T|1000T
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對細胞進行示蹤及增殖檢測的試劑盒,由CFDA,SE粉末、溶劑及相關(guān)細胞染色緩沖液組成,該試劑盒主要工作原理為:CFDA, SE具有細胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),后者可發(fā)強烈的綠色熒光,不能穿透細胞膜,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上,同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月,因此非常適用于細胞群落分析。
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半,通過流式細胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2的熒光強度),二次(1/4的熒光強度),三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSA,SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可用于成纖維細胞,自然殺傷細胞,造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式細胞儀檢測細胞增殖外,還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
本品為CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒,包含配制CFDA,SE儲存液所需的溶劑和細胞標記用的染色緩沖液,簡化了實驗前期準備工作。另,CFDA,SE標記細胞一般15min即可完成,對于不同細胞,需要自行摸索標記時間。按照每個樣本的標記體積為2ml計算。
注意事項
1)CFDA,SE易被水解,在水溶液中會很快變質(zhì)。因此保存過程中粉末或者儲存液都需干燥保存;而且使用過程中避免接觸水。但在標記細胞的過程中和水接觸是在許可范圍內(nèi)的。
2)CFDA,SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),于20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
3)不同的細胞其細胞內(nèi)酯酶活性不同,因此染色效果具有差異性。
4)雖然本試劑盒已對CFDA,SE染色體系做了優(yōu)化處理,但建議使用者根據(jù)自身的細胞類型,培養(yǎng)條件以及應(yīng)用的不同來梯度摸索的工作濃度,以最低濃度得到適宜的標記效率為準。
5)熒光染料均存在淬滅問題,染色過程需盡量避光。
6)為了您的健康,實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
儲存條件:-20℃,有效期1年
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
關(guān)鍵字: 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒;CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
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