細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
中文名稱:細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
英文名稱:CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T|1000T
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對(duì)細(xì)胞進(jìn)行示蹤及增殖檢測(cè)的試劑盒,由CFDA,SE粉末、溶劑及相關(guān)細(xì)胞染色緩沖液組成,該試劑盒主要工作原理為:CFDA, SE具有細(xì)胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),后者可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光,不能穿透細(xì)胞膜,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上,同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月,因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA,SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可用于成纖維細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞,造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
本品為CFDA,SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒,包含配制CFDA,SE儲(chǔ)存液所需的溶劑和細(xì)胞標(biāo)記用的染色緩沖液,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作。另,CFDA,SE標(biāo)記細(xì)胞一般15min即可完成,對(duì)于不同細(xì)胞,需要自行摸索標(biāo)記時(shí)間。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為2ml計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1)CFDA,SE易被水解,在水溶液中會(huì)很快變質(zhì)。因此保存過程中粉末或者儲(chǔ)存液都需干燥保存;而且使用過程中避免接觸水。但在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可范圍內(nèi)的。
2)CFDA,SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),于20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
3)不同的細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)酯酶活性不同,因此染色效果具有差異性。
4)雖然本試劑盒已對(duì)CFDA,SE染色體系做了優(yōu)化處理,但建議使用者根據(jù)自身的細(xì)胞類型,培養(yǎng)條件以及應(yīng)用的不同來梯度摸索的工作濃度,以最低濃度得到適宜的標(biāo)記效率為準(zhǔn)。
5)熒光染料均存在淬滅問題,染色過程需盡量避光。
6)為了您的健康,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期1年
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
關(guān)鍵字: 細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒;CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
上海澤葉生物科技有限公司是一家服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè),主要為科研機(jī)構(gòu)、高校、院所及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)研究提供所需要的科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)等。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、材料科學(xué),通用試劑、藥物合成試劑、手性化合物、催化劑及配體、分析試劑、生物試劑,檢測(cè)試劑等等