pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)
pCMV-C-mCherry是信裕生物自行研發(fā)的哺乳動物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)C端含mCherry (DsRed的突變體，一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以高效啟動目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的后面有一個mCherry的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)C端含有mCherry標(biāo)簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
pCMV-C-mCherry質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Multiple cloning site
651-736
T7 promoter and T7 primer binding site
1501-1522
SV40 polyAsignal
1534-1917
f1 origin of ss-DNA replication
2055-2361
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2903-3694
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3695-4153
pCMV-C-mCherry質(zhì)粒(5001bp)的圖譜如下：
pCMV-C-mCherry的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI mCherry
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
ATGGTGAGCA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
TACCACTCGT
751
AGGGCGAGGA
GGATAACATG
GCCATCATCA
AGGAGTTCAT
GCGCTTCAAG
TCCCGCTCCT
CCTATTGTAC
CGGTAGTAGT
TCCTCAAGTA
CGCGAAGTTC
801
GTGCACATGG
AGGGCTCCGT
GAACGGCCAC
GAGTTCGAGA
TCGAGGGCGA
CACGTGTACC
TCCCGAGGCA
CTTGCCGGTG
CTCAAGCTCT
AGCTCCCGCT
851
GGGCGAGGGC
CGCCCCTACG
AGGGCACCCA
GACCGCCAAG
CTGAAGGTGA
CCCGCTCCCG
GCGGGGATGC
TCCCGTGGGT
CTGGCGGTTC
GACTTCCACT
901
CCAAGGGTGG
CCCCCTGCCC
TTCGCCTGGG
ACATCCTGTC
CCCTCAGTTC
GGTTCCCACC
GGGGGACGGG
AAGCGGACCC
TGTAGGACAG
GGGAGTCAAG
951
ATGTACGGCT
CCAAGGCCTA
CGTGAAGCAC
CCCGCCGACA
TCCCCGACTA
TACATGCCGA
GGTTCCGGAT
GCACTTCGTG
GGGCGGCTGT
AGGGGCTGAT
1001
CTTGAAGCTG
TCCTTCCCCG
AGGGCTTCAA
GTGGGAGCGC
GTGATGAACT
GAACTTCGAC
AGGAAGGGGC
TCCCGAAGTT
CACCCTCGCG
CACTACTTGA
1051
TCGAGGACGG
CGGCGTGGTG
ACCGTGACCC
AGGACTCCTC
CCTGCAGGAC
AGCTCCTGCC
GCCGCACCAC
TGGCACTGGG
TCCTGAGGAG
GGACGTCCTG
1101
GGCGAGTTCA
TCTACAAGGT
GAAGCTGCGC
GGCACCAACT
TCCCCTCCGA
CCGCTCAAGT
AGATGTTCCA
CTTCGACGCG
CCGTGGTTGA
AGGGGAGGCT
1151
CGGCCCCGTA
ATGCAGAAGA
AGACCATGGG
CTGGGAGGCC
TCCTCCGAGC
GCCGGGGCAT
TACGTCTTCT
TCTGGTACCC
GACCCTCCGG
AGGAGGCTCG
1201
GGATGTACCC
CGAGGACGGC
GCCCTGAAGG
GCGAGATCAA
GCAGAGGCTG
CCTACATGGG
GCTCCTGCCG
CGGGACTTCC
CGCTCTAGTT
CGTCTCCGAC
1251
AAGCTGAAGG
ACGGCGGCCA
CTACGACGCT
GAGGTCAAGA
CCACCTACAA
TTCGACTTCC
TGCCGCCGGT
GATGCTGCGA
CTCCAGTTCT
GGTGGATGTT
1301
GGCCAAGAAG
CCCGTGCAGC
TGCCCGGCGC
CTACAACGTC
AACATCAAGT
CCGGTTCTTC
GGGCACGTCG
ACGGGCCGCG
GATGTTGCAG
TTGTAGTTCA
1351
TGGACATCAC
CTCCCACAAC
GAGGACTACA
CCATCGTGGA
ACAGTACGAA
ACCTGTAGTG
GAGGGTGTTG
CTCCTGATGT
GGTAGCACCT
TGTCATGCTT
1401
CGCGCCGAGG
GCCGCCACTC
CACCGGCGGC
ATGGACGAGC
TGTACAAGTA
GCGCGGCTCC
CGGCGGTGAG
GTGGCCGCCG
TACCTGCTCG
ACATGTTCAT
1451
GGGGCCCGGT
ACCTTAATTA
ATTAAGGTAC
CAGGTAAGTG
TACCCAATTC
CCCCGGGCCA
TGGAATTAAT
TAATTCCATG
GTCCATTCAC
ATGGGTTAAG
pCMV-C-mCherry中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)包括：
AclI
AfeI
AflII
AgeI
AscI
AsiSI
BaeI
BcgI
BlpI
BmgBI
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NruI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
ScaI
SpeI
pCMV-C-mCherry中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
PflMI
CCAN,NNN`NTGG
1177
SnaBI
TAC|GTA
346
Bpu10I
CC`TNA,GC
1282
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
BbvCI
CC`TCA,GC
1282
NheI
G`CTAG,C
597
BsgI
GTGCAG(N)14,NN`
1333
BmtI
G,CTAG`C
597
SgrAI
CR`CCGG,YG
1422
SacI
G,AGCT`C
651
XcmI
CCANNNN,N`NNNNTGG
1426
Eco53kI
GAG|CTC
653
BsrGI
T`GTAC,A
1441
BstXI
CCAN,NNNN`NTGG
659
PspOMI
G`GGCC,C
1452
SacII
CC,GC`GG
660
ApaI
G,GGCC`C
1452
NotI
GC`GGCC,GC
668
PvuI
CG,AT`CG
1532
TspMI
C`CCGG,G
680
BclI
T`GATC,A
1688
XmaI
C`CCGG,G
680
MfeI
C`AATT,G
1781
SmaI
CCC|GGG
682
HpaI
GTT|AAC
1794
BamHI
G`GATC,C
687
BtsI
GCAGTG,NN`
1868
HindIII
A`AGCT,T
693
MluI
A`CGCG,T
1917
EcoRI
G`AATT,C
705
DraIII
CAC,NNN`GTG
2144
EcoRV
GAT|ATC
713
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2803
SalI
G`TCGA,C
717
ClaI
AT`CG,AT
2871
AccI
GT`MK,AC
718
BspDI
AT`CG,AT
2871
BglII
A`GATC,T
723
PflFI
GACN`N,NGTC
3149
XhoI
C`TCGA,G
729
Tth111I
GACN`N,NGTC
3149
PaeR7I
C`TCGA,G
729
BsrDI
GCAATG,NN`
3262
XbaI
T`CTAG,A
735
RsrII
CG`GWC,CG
3547
AhdI
GACNN,N`NNGTC
934
BstBI
TT`CG,AA
3713
SbfI
CC,TGCA`GG
1092
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4020
BbsI
GAAGACNN`NNNN,
1176
PciI
A`CATG,T
4949
pCMV-C-mCherry質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′
pCMV-C-mCherry的全序列信息：D2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt
pCMV-C-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請參考圖1。
圖1. pCMV-C-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場照片，右側(cè)為熒光照片。
包裝清單：
KL-2628-1μg
pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)
1μg
KL-2628-100μg
pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)說明書；pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。