??????pCMV-C-mCherry是碧云天自行研發(fā)的哺乳動物細胞表達質粒,用于表達C端含mCherry?(DsRed的突變體,一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質粒含有CMV啟動子,可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的后面有一個mCherry的完整編碼序列,因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達C端含有mCherry標簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內定位,也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性,不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后,可以使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。 ??????pCMV-C-mCherry質粒的主要信息如下:
??????pCMV-C-mCherry質粒(5001bp)的圖譜如下:
??????pCMV-C-mCherry的多克隆位點的詳細圖譜如下:
??????pCMV-C-mCherry中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)包括:
??????pCMV-C-mCherry中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:
??????pCMV-C-mCherry質粒中推薦使用的測序引物序列如下: ??????T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′ ??????C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′ ??????pCMV-C-mCherry的全序列信息:D2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt ??????pCMV-C-mCherry質粒轉染細胞后的表達效果請參考圖1。
圖1. pCMV-C-mCherry質粒轉染細胞后的表達效果圖。左側為明場照片,右側為熒光照片。
包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存。 注意事項: ??????本質粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。 ??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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