產(chǎn)品編號 |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品包裝 |
產(chǎn)品價(jià)格 |
D2628-100μg |
pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白) |
100μg |
1086.00元 |
??????pCMV-C-mCherry是碧云天自行研發(fā)的哺乳動物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒,用于表達(dá)C端含mCherry?(DsRed的突變體,一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子,可以高效啟動目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的后面有一個mCherry的完整編碼序列,因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)C端含有mCherry標(biāo)簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位,也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性,不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
??????pCMV-C-mCherry質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
|
Position
|
CMV promoter
|
1-602
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
Multiple cloning site
|
651-736
|
mCherry
|
741-1451
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
1501-1522
|
SV40 polyAsignal
|
1534-1917
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
2055-2361
|
bla promoter
|
2386-2510
|
SV40 promoter
|
2530-2868
|
Neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2903-3694
|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
|
3695-4153
|
pUC origin
|
4282-4949
|
??????pCMV-C-mCherry質(zhì)粒(5001bp)的圖譜如下:
??????pCMV-C-mCherry的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下:
SmaI
|
|
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
|
|
651
|
GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
CCGCTCTAGC
|
CCGGGCGGAT
|
CCAAGCTTCT
|
|
CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
GGCGAGATCG
|
GGCCCGCCTA
|
GGTTCGAAGA
|
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI mCherry
|
701
|
GCAGGAATTC
|
GATATCGTCG
|
ACAGATCTCT
|
CGAGTCTAGA
|
ATGGTGAGCA
|
|
|
CGTCCTTAAG
|
CTATAGCAGC
|
TGTCTAGAGA
|
GCTCAGATCT
|
TACCACTCGT
|
|
751
|
AGGGCGAGGA
|
GGATAACATG
|
GCCATCATCA
|
AGGAGTTCAT
|
GCGCTTCAAG
|
|
|
TCCCGCTCCT
|
CCTATTGTAC
|
CGGTAGTAGT
|
TCCTCAAGTA
|
CGCGAAGTTC
|
|
801
|
GTGCACATGG
|
AGGGCTCCGT
|
GAACGGCCAC
|
GAGTTCGAGA
|
TCGAGGGCGA
|
|
|
CACGTGTACC
|
TCCCGAGGCA
|
CTTGCCGGTG
|
CTCAAGCTCT
|
AGCTCCCGCT
|
|
851
|
GGGCGAGGGC
|
CGCCCCTACG
|
AGGGCACCCA
|
GACCGCCAAG
|
CTGAAGGTGA
|
|
|
CCCGCTCCCG
|
GCGGGGATGC
|
TCCCGTGGGT
|
CTGGCGGTTC
|
GACTTCCACT
|
|
901
|
CCAAGGGTGG
|
CCCCCTGCCC
|
TTCGCCTGGG
|
ACATCCTGTC
|
CCCTCAGTTC
|
|
|
GGTTCCCACC
|
GGGGGACGGG
|
AAGCGGACCC
|
TGTAGGACAG
|
GGGAGTCAAG
|
|
951
|
ATGTACGGCT
|
CCAAGGCCTA
|
CGTGAAGCAC
|
CCCGCCGACA
|
TCCCCGACTA
|
|
|
TACATGCCGA
|
GGTTCCGGAT
|
GCACTTCGTG
|
GGGCGGCTGT
|
AGGGGCTGAT
|
|
1001
|
CTTGAAGCTG
|
TCCTTCCCCG
|
AGGGCTTCAA
|
GTGGGAGCGC
|
GTGATGAACT
|
|
|
GAACTTCGAC
|
AGGAAGGGGC
|
TCCCGAAGTT
|
CACCCTCGCG
|
CACTACTTGA
|
|
1051
|
TCGAGGACGG
|
CGGCGTGGTG
|
ACCGTGACCC
|
AGGACTCCTC
|
CCTGCAGGAC
|
|
|
AGCTCCTGCC
|
GCCGCACCAC
|
TGGCACTGGG
|
TCCTGAGGAG
|
GGACGTCCTG
|
|
1101
|
GGCGAGTTCA
|
TCTACAAGGT
|
GAAGCTGCGC
|
GGCACCAACT
|
TCCCCTCCGA
|
|
|
CCGCTCAAGT
|
AGATGTTCCA
|
CTTCGACGCG
|
CCGTGGTTGA
|
AGGGGAGGCT
|
|
1151
|
CGGCCCCGTA
|
ATGCAGAAGA
|
AGACCATGGG
|
CTGGGAGGCC
|
TCCTCCGAGC
|
|
|
GCCGGGGCAT
|
TACGTCTTCT
|
TCTGGTACCC
|
GACCCTCCGG
|
AGGAGGCTCG
|
|
1201
|
GGATGTACCC
|
CGAGGACGGC
|
GCCCTGAAGG
|
GCGAGATCAA
|
GCAGAGGCTG
|
|
|
CCTACATGGG
|
GCTCCTGCCG
|
CGGGACTTCC
|
CGCTCTAGTT
|
CGTCTCCGAC
|
|
1251
|
AAGCTGAAGG
|
ACGGCGGCCA
|
CTACGACGCT
|
GAGGTCAAGA
|
CCACCTACAA
|
|
|
TTCGACTTCC
|
TGCCGCCGGT
|
GATGCTGCGA
|
CTCCAGTTCT
|
GGTGGATGTT
|
|
1301
|
GGCCAAGAAG
|
CCCGTGCAGC
|
TGCCCGGCGC
|
CTACAACGTC
|
AACATCAAGT
|
|
|
CCGGTTCTTC
|
GGGCACGTCG
|
ACGGGCCGCG
|
GATGTTGCAG
|
TTGTAGTTCA
|
|
1351
|
TGGACATCAC
|
CTCCCACAAC
|
GAGGACTACA
|
CCATCGTGGA
|
ACAGTACGAA
|
|
|
ACCTGTAGTG
|
GAGGGTGTTG
|
CTCCTGATGT
|
GGTAGCACCT
|
TGTCATGCTT
|
|
1401
|
CGCGCCGAGG
|
GCCGCCACTC
|
CACCGGCGGC
|
ATGGACGAGC
|
TGTACAAGTA
|
|
|
GCGCGGCTCC
|
CGGCGGTGAG
|
GTGGCCGCCG
|
TACCTGCTCG
|
ACATGTTCAT
|
ApaI
|
1451
|
GGGGCCCGGT
|
ACCTTAATTA
|
ATTAAGGTAC
|
CAGGTAAGTG
|
TACCCAATTC
|
|
CCCCGGGCCA
|
TGGAATTAAT
|
TAATTCCATG
|
GTCCATTCAC
|
ATGGGTTAAG
|
??????pCMV-C-mCherry中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)包括:
AclI
|
AfeI
|
AflII
|
AgeI
|
AscI
|
AsiSI
|
BaeI
|
BcgI
|
BlpI
|
BmgBI
|
BsiWI
|
BsmBI
|
BspEI
|
BspQI
|
BssHII
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
FseI
|
NruI
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
PspXI
|
SapI
|
ScaI
|
SpeI
|
SwaI
|
XmnI
|
|
??????pCMV-C-mCherry中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
PflMI
|
CCAN,NNN`NTGG
|
1177
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
Bpu10I
|
CC`TNA,GC
|
1282
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
380
|
|
BbvCI
|
CC`TCA,GC
|
1282
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
BsgI
|
GTGCAG(N)14,NN`
|
1333
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
SgrAI
|
CR`CCGG,YG
|
1422
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
XcmI
|
CCANNNN,N`NNNNTGG
|
1426
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1441
|
BstXI
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
659
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1452
|
SacII
|
CC,GC`GG
|
660
|
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
1452
|
NotI
|
GC`GGCC,GC
|
668
|
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
1532
|
TspMI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1688
|
XmaI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
MfeI
|
C`AATT,G
|
1781
|
SmaI
|
CCC|GGG
|
682
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1794
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
687
|
|
BtsI
|
GCAGTG,NN`
|
1868
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
693
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1917
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
705
|
|
DraIII
|
CAC,NNN`GTG
|
2144
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
713
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2803
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
717
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2871
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
718
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2871
|
BglII
|
A`GATC,T
|
723
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3149
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3149
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3262
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
735
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3547
|
AhdI
|
GACNN,N`NNGTC
|
934
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3713
|
SbfI
|
CC,TGCA`GG
|
1092
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
4020
|
BbsI
|
GAAGACNN`NNNN,
|
1176
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4949
|
??????pCMV-C-mCherry質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下:
??????T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
??????C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′
??????pCMV-C-mCherry的全序列信息:D2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt
??????pCMV-C-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請參考圖1。
圖1. pCMV-C-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場照片,右側(cè)為熒光照片。
包裝清單:
產(chǎn)品編號
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
D2628-1μg
|
pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)
|
1μg
|
D2628-100μg
|
pCMV-C-mCherry (紅色熒光蛋白)
|
100μg
|
—
|
說明書
|
1份
|
保存條件:
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng):
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。