成人免费xx,国产又黄又湿又刺激不卡网站,成人性视频app菠萝网站,色天天天天

超級雜交液(原位雜交用),SuperHyb Solution for ISH
  • 超級雜交液(原位雜交用),SuperHyb Solution for ISH

超級雜交液(原位雜交用)

價格 790
包裝 10mL
最小起訂量 10mL
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-11-12
微信洽談

產(chǎn)品詳情

中文名稱:超級雜交液(原位雜交用)英文名稱:SuperHyb Solution for ISH
保存條件: 常溫運輸和保存純度規(guī)格: 99.9%
產(chǎn)品類別: 分子生物試劑 探針標記及檢測
2024-11-12 超級雜交液(原位雜交用) SuperHyb Solution for ISH 10mL/790RMB 790 常溫運輸和保存 99.9% 分子生物試劑 探針標記及檢測

超級雜交液(原位雜交用)
產(chǎn)品及特點 原位雜交是在一定生物結構基礎之上的核酸雜交。這種結構基礎可以是一條染色體;一個細菌;更大結構基礎是細胞和組織。基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或NA-RNA 雙鍵分子,應用帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用放射自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節(jié)機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。本產(chǎn)品為公司開發(fā)的即用型原位雜交專用核酸雜交液。既可以用于RNA原位雜交、DNA原位雜交,也可以用于FISH原位雜交等試驗。

超級雜交液(原位雜交用)運輸及保存 低溫運輸和-20℃保存、有效期一年。

自備試劑 蓋玻片、多聚甲醛等

使用方法 以檢測 mRNA 序列為例。培養(yǎng)細胞和冰凍切片

1. 玻片的處理:一般采用多聚賴氨酸或 APES。切片厚度 10-20μm。

2. 細胞在多聚賴氨酸處理的蓋玻片上進行培養(yǎng),條件為 37℃和 5%的 CO2,所用培養(yǎng)基為 Dulbecco 基礎培養(yǎng)基。細胞長好后 0.1M PBS(PH7.4)洗 2分鐘×3 次。

3. 培養(yǎng)細胞和冰凍切片均可用下述方法固定:固定液為 4%多聚甲醛/0.1 MPBS (PH7.2-7.6),含有 1/1000 DEPC。室溫固定 20--30 分鐘。蒸餾水充分洗滌,干燥后-20℃冰凍可保存 2 周以上。

4. 30%H2O2 1 份+純甲醇 50 份混合,室溫處理 30 分鐘。蒸餾水洗滌 3 次。

5. 暴露 mRNA 核酸片段:切片上滴加 3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶(1ml3% 檸檬酸加 2 滴濃縮型胃蛋白酶,混勻),37℃或室溫消化 5—120 秒鐘。有時也可以不消化。原位雜交用 PBS 洗 3 次×5 分鐘。蒸餾水洗 1 次。

6. 后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液為 1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有 1/1000 DEPC。室溫固定 10 分鐘。蒸餾水洗滌 3次。

7. 預雜交:濕盒的準備——干的雜交盒底部加 20%甘油 20ml 以保持濕度。按每張切片加 20μL 預雜交液(提前加入鮭魚精 DNA,終濃度為100ug/ml)。恒溫箱 38-42℃2—4 小時。吸取多余液體,不洗。

注:靶 DNA 的變性

DNA-DNA 雜交檢測中,在雜交前需要增加靶 DNA 的變性步驟(對 mRNA的原位雜交無需此步)。樣品 DNA 的變性可能會造成樣品形態(tài)學的部分破壞,此步是實驗中需要優(yōu)化的一個步驟。實驗時可以摸索變性時間、變性溫度等參數(shù)以獲得條件。可以將探針的變性和樣品 DNA 變性同步進行:將樣品和探針溶液加蓋蓋玻片,置于烘箱 80℃變性 ,處 理 5-10 min,后冷卻至 37℃進行雜交。

8. 雜交——按每張切片 20μL 雜交液(探針濃度約為 1ng/ul;雜交液提前加入鮭魚精 DNA,終濃度為 100ug/ml),加在切片上。將原位雜交專用蓋玻片的保護膜揭開后,蓋在切片上。恒溫箱 38-42℃雜交過夜(根據(jù)雜交情況可以調節(jié))。

9. 雜交后洗滌:揭掉蓋玻片,37℃左右水溫的 2×SSC 洗滌 5 分鐘×2 次;37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色,重復 0.2×SSC 洗滌 15 分鐘×1-2 次)。

10. 滴加封閉液:37℃30 分鐘。甩去多余液體,不洗。

11. 根據(jù)探針標記物,選擇相應顯色方法顯色、復染,脫水、封片。

12. 結果觀察。

石蠟切片

如果有條件的話,應盡可能地采用新鮮標本。標本離體后,及時予以固定。固定液為 4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有 1/1000 DEPC。標本較大時用刀片切成厚度不超過 4mm 的小塊,固定 1 小時即可,較大的標本固定不要超過 2 小時。某些組織對過度固定尤其敏感,如動物大腦,固定時間30-40 分鐘,一般不要超過 1 小時。

1.常規(guī)脫水、浸蠟、包埋。切片厚度 6-8μm。

2.玻片的處理:一般采用多聚賴氨酸或 APES。

3.石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水。30%H2O2 1 份+蒸餾水 10 份混合,室溫 5-10分鐘以滅活內源性酶。蒸餾水洗 3 次。

4.暴露 mRNA 核酸片段:切片上滴加 3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶(1ml3% 檸檬酸加 2 滴濃縮型胃蛋白酶,混勻),37℃或室溫消化 3--30 分鐘(視標本新舊、厚薄自行調整)。用戶可以比較不同的消化時間,例如 5 分鐘,10 分鐘,20 分鐘,30 分鐘。以找到消化時間。原位雜交用 PBS 洗 3 次×5分鐘。蒸餾水洗 1 次。

5. 其余步驟和冰凍切片 6-11 步相同。

6. 結果觀察。

關鍵字: 超級雜交液(原位雜交用)廠家;超級雜交液(原位雜交用)現(xiàn)貨

公司簡介

上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質量和完善的售后服務確。
成立日期 2015-05-29 (10年) 注冊資本 100萬元整
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內
主營行業(yè) 中間體,化學試劑,醫(yī)藥原料 經(jīng)營模式 工廠
  • 上??道噬锟萍加邢薰?/span>
VIP 6年
  • 公司成立:10年
  • 注冊資本:100萬元整
  • 企業(yè)類型:廠家
  • 主營產(chǎn)品:主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒、重組蛋白、抗體、生化試劑、標準品、分子生物學試劑、細胞生物學等科研用品
  • 公司地址:松江區(qū)新橋鎮(zhèn)賣新公路2077號3089室
詢盤

超級雜交液(原位雜交用)相關廠家報價

產(chǎn)品名稱 價格   公司名稱 報價日期
¥790
VIP5年
上海澤葉生物科技有限公司
2024-11-12
詢價
VIP3年
上海嘉定區(qū)澄瀏公路52號
2024-11-12
¥2500
VIP1年
上海晶風生物科技有限公司
2024-11-12
詢價
VIP5年
上海賓穗生物科技有限公司
2024-11-12
內容聲明:
以上所展示的信息由商家自行提供,內容的真實性、準確性和合法性由發(fā)布商家負責。 商家發(fā)布價格指該商品的參考價格,并非原價,該價格可能隨著市場變化,或是由于您購買數(shù)量不同或所選規(guī)格不同而發(fā)生變化。最終成交價格,請咨詢商家,以實際成交價格為準。請意識到互聯(lián)網(wǎng)交易中的風險是客觀存在的
主頁 | 企業(yè)會員服務 | 廣告業(yè)務 | 聯(lián)系我們 | 舊版入口 | 中文MSDS | CAS Index | 常用化學品CAS列表 | 化工產(chǎn)品目錄 | 新產(chǎn)品列表 |投訴中心
Copyright ? 2008 ChemicalBook 京ICP備07040585號  京公海網(wǎng)安備110108000080號  All rights reserved.
400-158-6606