產(chǎn)品描述
動物組織直接PCR試劑盒是一款可直接對不同動物組織進行PCR擴增的試劑盒，適應(yīng)性廣、穩(wěn)定性強。試劑盒采用獨特的裂解緩沖液體系，可以快速的裂解多種動物組織樣品并釋放出基因組DNA，不需要除去蛋白、RNA等，即可將釋放出的基因組DNA作為模板直接用于PCR反應(yīng)。此外，樣品使用量少，低至5 mg動物組織即可進行實驗。
本試劑盒中提供的2× Tissue Master Mix(With Dye)具有很強的擴增兼容性，能直接以待測樣品裂解液為模板，進行高效特異性擴增。該試劑為2倍濃縮PCR反應(yīng)混合液，包含了用于PCR擴增除模板和引物外的所有組分，大大簡化操作過程，降低污染幾率。
該試劑盒可用于轉(zhuǎn)基因型鑒定、動物基因分型等。
產(chǎn)品組分
a）2× Tissue Master Mix(With Dye)：包含Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等，產(chǎn)品已混合溴酚藍染料（不含SDS），PCR產(chǎn)物可以直接進行電泳。
運輸方法
冰袋運輸。
保存方法
1. 試劑10184-A【Buffer AL】，在常溫干燥條件下，可保存12個月，如需保存更長時間可置于4℃。低溫保存，易出現(xiàn)沉淀，可平衡至室溫或37℃水浴10 min，待沉淀溶解后，混勻使用。
2. 試劑10184-B【Protease】，具有獨特配方，為保證其更好的活性和穩(wěn)定性，建議4℃保存，切勿置于-20℃。
3. 試劑10184-C【2× Tissue Master Mix(With Dye)】，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
操作方法
樣品基因組DNA釋放
1. 在離心管中加入100 μL Buffer AL，4 μL Protease，輕輕渦旋混勻。
【注】：Buffer AL與Protease混合后盡快使用，不宜長期保存。
2. 取5-10 mg動物組織，置于上述離心管中，輕輕渦旋混勻。
【注】：組織應(yīng)盡量剪碎，以便酶解反應(yīng)更順利進行。
3. 65℃孵育10-30 min，然后95℃處理5 min。
【注】：65℃孵育，一般10 min即可滿足多數(shù)PCR需求。若需要的DNA量較大或樣品較難酶解，可將時間延長至30 min。組織塊不需完全酶解，殘余的部分在后續(xù)離心步驟中可被除去。
4. 12000 rpm離心5 min。
5. 將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管，4℃或-20℃保存或直接用于PCR擴增。
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上海翊圣生物科技有限公司（Yeasen Biotech Co., Ltd.）成立于2009年，是專注于酶制劑和抗原抗體開發(fā)的高新技術(shù)型企業(yè)，致力于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)的科研客戶及精準醫(yī)療相關(guān)行業(yè)的工業(yè)客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
公司現(xiàn)階段建設(shè)有分子、蛋白、細胞和免疫四大技術(shù)平臺，涵蓋全面豐富的產(chǎn)品線，包括PCR、qPCR、高保真DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄相關(guān)制劑、克隆試劑盒、高通量測序MaxUP系列DNA和RNA建庫試劑盒、細胞培養(yǎng)、支原體檢測/預(yù)防/去除試劑，以及體外診斷相關(guān)的酶原料、試劑和磁珠等3000多種試劑和試劑盒，服務(wù)于全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等2.5萬家客戶，助力發(fā)表高質(zhì)量SCI論文1000余篇。
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