??????碧云天生產(chǎn)的動(dòng)物組織直接PCR試劑盒(Animal Tissue Direct PCR Kit)可以從鼠尾(mouse tail)、鼠耳(mouse ear)或其它動(dòng)物組織如口腔取樣棉簽(buccal swabs)、頭發(fā)(hair shafts)、唾液(saliva)等中快速提取和PCR擴(kuò)增基因組DNA以用于基因型鑒定等。 ??????本試劑盒能快速消化組織樣品獲得基因組DNA,無(wú)需機(jī)械破碎、有機(jī)萃取、柱純化和DNA沉淀,基因組DNA抽提的過(guò)程僅需約20分鐘。 ??????本試劑盒適用于小鼠等的基因型鑒定(genotyping),大規(guī)模生物樣品的高通量PCR篩選(high-through PCR screening),轉(zhuǎn)基因篩選(transgene screening),基因敲除分析(knockout analysis)和測(cè)序(sequencing)。 ??????本試劑盒中提供的Easy-Load? PCR Master Mix (Green, 2X)中含有2X Taq DNA Polymerase,2X PCR Buffer,2X dNTP和2X上樣緩沖液,只需加入適量引物、模板和水即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增,大大簡(jiǎn)化了PCR操作,減少了PCR操作過(guò)程中可能導(dǎo)致的污染。PCR完成后可以直接上樣電泳,無(wú)需再添加上樣緩沖液。 ??????使用本試劑盒進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí)僅需極少量的樣品就能完成目的基因的擴(kuò)增和分析。 ??????使用本試劑盒提取的小鼠尾巴基因組DNA直接PCR的效果可參照?qǐng)D1。
??????圖1. 本試劑盒提取的小鼠尾巴基因組DNA直接PCR后的電泳圖。PCR反應(yīng)使用的引物是根據(jù)小鼠GAPDH和HSP70基因序列進(jìn)行設(shè)計(jì)的,泳道1(GAPDH)和2(HSP70)的PCR產(chǎn)物大小分別為299bp和403bp。M, marker。
??????對(duì)于20微升的PCR反應(yīng)體系,本試劑盒的兩種包裝分別可用于100個(gè)或500個(gè)樣品的直接PCR反應(yīng)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。DNA Extraction Solution和Stop Solution可以4℃保存,3個(gè)月內(nèi)有效。 注意事項(xiàng): ??????使用本試劑盒消化小鼠尾巴或其它組織樣品時(shí),一定要確保組織樣品充分浸沒(méi)在消化液中。 ??????配制消化液時(shí),DNA Extraction Solution和Enzyme Mix混勻后,應(yīng)盡快使用,放置太久可能會(huì)影響DNA抽提效果。 ??????由于PCR反應(yīng)非常靈敏,可以擴(kuò)增目的基因片段超過(guò)1000萬(wàn)倍,在使用Taq酶時(shí)請(qǐng)注意避免微量待擴(kuò)增DNA的污染,并盡量考慮設(shè)置不加模板的空白對(duì)照以確認(rèn)是否有待擴(kuò)增DNA的污染。 ??????本試劑盒中的Easy-Load? PCR Master Mix (Green, 2X)經(jīng)過(guò)15次反復(fù)凍融后仍具有和凍融前幾乎相同的PCR擴(kuò)增效果,但仍宜適當(dāng)避免過(guò)多的反復(fù)凍融,并且在使用前,一定要完全融化,并上下顛倒輕輕混勻后才能使用,并盡量避免起泡。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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