產(chǎn)品描述
2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)是即用型的PCR預(yù)混合溶液，含有HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系，只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增，大大簡化了實驗的操作步驟，可以高通量操作并提高實驗結(jié)果的重現(xiàn)性。HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase是經(jīng)過配體修飾的熱穩(wěn)定 Taq DNA Polymerase，該配體可以隨溫度變化來調(diào)節(jié) DNA 聚合酶活性。在室溫下酶活性被完全封閉，經(jīng) 95℃加熱后活性才被釋放。HieffTM HotStart DNA Polymerase 的激活時間只需要 2-3 min，兼容現(xiàn)有的 PCR 程序。本產(chǎn)品防止了在樣品準(zhǔn)備及反應(yīng)升溫階段產(chǎn)生非特異擴(kuò)增，可以有效地進(jìn)行基因分型實驗。
產(chǎn)品應(yīng)用
本產(chǎn)品主要應(yīng)用于小鼠基因型鑒定。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測：20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的電泳譜帶無變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測：20 μL本品和1 μg λDNA，37℃溫育4 h，DNA的電泳譜帶無變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測: 50 μL體系中，加入25 μL本品，以無菌ddH2O為模板，擴(kuò)增E.coil 16s rDNA 基因。30個循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴(kuò)增條帶。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存，有效期2年。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
PCR反應(yīng)體系（50 μL）
【注】：針對不同模板的反應(yīng)濃度有所不同，下表為50 μL反應(yīng)體系推薦模板使用量，僅供參考。
PCR擴(kuò)增程序
【注】：
1）退火溫度和時間：退火溫度推薦使用50-60℃。退火時間推薦設(shè)置為30 sec，可以在20-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度和時間。
2）延伸溫度和時間：溫度推薦使用72℃。時間推薦使用30-60 sec/kb。
3）擴(kuò)增產(chǎn)物：請將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物放置于-20℃保存，防止DNA發(fā)生降解。
關(guān)鍵字： 2X 熱啟動 PCR 預(yù)混液_PCR相關(guān)_
上海翊圣生物科技有限公司（Yeasen Biotech Co., Ltd.）成立于2009年，是專注于酶制劑和抗原抗體開發(fā)的高新技術(shù)型企業(yè)，致力于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)的科研客戶及精準(zhǔn)醫(yī)療相關(guān)行業(yè)的工業(yè)客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
公司現(xiàn)階段建設(shè)有分子、蛋白、細(xì)胞和免疫四大技術(shù)平臺，涵蓋全面豐富的產(chǎn)品線，包括PCR、qPCR、高保真DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄相關(guān)制劑、克隆試劑盒、高通量測序MaxUP系列DNA和RNA建庫試劑盒、細(xì)胞培養(yǎng)、支原體檢測/預(yù)防/去除試劑，以及體外診斷相關(guān)的酶原料、試劑和磁珠等3000多種試劑和試劑盒，服務(wù)于全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等2.5萬家客戶，助力發(fā)表高質(zhì)量SCI論文1000余篇。
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