V8蛋白酶

Cat.No.：66676-43-5

EC：3.4.21.19

全名: 序列分析純V8蛋白酶；金黃色葡萄球菌V8蛋白酶

別名: V8蛋白酶；谷氨酰胺內(nèi)切酶；天冬酰胺內(nèi)切酶

儲(chǔ)存條件：凍干粉，2-8℃

來源：基因工程生產(chǎn)，大腸桿菌表達(dá)。

1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介

V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵。在pH 7.8的NH₄HCO₃和pH 4.0的CH₃COONH₄緩沖液中識(shí)別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識(shí)別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對(duì)Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。在進(jìn)行蛋白質(zhì)酶切測(cè)序、肽圖譜分析和肽質(zhì)量指紋圖譜分析中使用時(shí)，可以單獨(dú)使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2- 巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺?；?L-賴氨酸氯甲基酮（TLCK）。

2.產(chǎn)品特性

單位定義：在25℃，pH7.8的條件下，每分鐘催化底物（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol對(duì)硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量為一個(gè)酶活性單位。

3.儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃，24個(gè)月穩(wěn)定；

溶解后穩(wěn)定性：用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6個(gè)月穩(wěn)定；用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，無菌），2個(gè)月穩(wěn)定；用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可維持85%以上；溶解后溶液可反復(fù)凍融10次無活性損失。

運(yùn)輸穩(wěn)定性：藍(lán)冰保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。

4.推薦使用方法

1）使用前注意

  可按使用量分裝以限度避免污染或自切。

2）目的蛋白溶解

  用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50mM NH₄HCO₃ pH7.8，若溶解度不好對(duì)目的蛋白變性，添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對(duì)V8蛋白酶的影響見表一。

3）酶切

  V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100（W/W)，25℃或37℃酶切2-18h。

表一：V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑，尿素25℃2h，SDS25℃12h的穩(wěn)定性

（注：V8蛋白酶0.5mg/ml，50mM Tris-HCl pH8.0）

5.產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

序列分析純蛋白酶：特異性高，穩(wěn)定性好。

無動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料。

質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn) 品批次間無差異，質(zhì)量穩(wěn)定。

純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。

凍干粉：易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。

符合法規(guī)要求：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過程完全遵循NSF ISO 9001:2008質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。

質(zhì)量文件完整：按客戶需求，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。

6.相關(guān)產(chǎn)品

重組腸激酶；

序列分析純羧肽酶B；

序列分析純胰蛋白酶；

序列分析純糜蛋白酶。