乙型肝炎病毒誘發(fā)的乙型肝炎是一個(gè)嚴(yán)重的健康問題。毛細(xì)蒿(Yin-Chen)在中醫(yī)中長(zhǎng)期用于治療肝炎。香豆素、黃酮類化合物和有機(jī)酸被發(fā)現(xiàn)是其保肝和利膽成分,但其抗HBV活性成分仍然未知。本研究主要通過各種色譜方法對(duì)其抗HBV活性成分進(jìn)行研究。方法和結(jié)果:LC/MS和生物測(cè)定指導(dǎo)下對(duì)毛細(xì)血管青蒿活性提取物進(jìn)行分餾,分離出9種綠原酸類似物。通過MS/MS和NMR技術(shù)闡明了分離株的結(jié)構(gòu)。體外對(duì)HepG 2.2.15細(xì)胞系進(jìn)行抗HBV檢測(cè):采用ELISA法測(cè)定HBsAg和HBeAg分泌物的減少;通過實(shí)時(shí)定量PCR監(jiān)測(cè)HBV DNA復(fù)制的抑制,并通過MTT方法評(píng)估細(xì)胞毒性。 90%乙醇提取物對(duì)HBV DNA復(fù)制具有顯著抑制活性,IC??值為76.1±3.9 μg/mL,細(xì)胞毒性作用低(SI>20.1)。為了明確其活性成分,將提取物進(jìn)一步分離為3個(gè)亞組分(AC-1、AC-2和AC-3),其中Fr.AC-2是對(duì)HBeAg分泌和HBV DNA復(fù)制最有效的組分,IC50值為44.2 ± 2.8和23.2 ±1.9 μg/mL。通過LC/MS技術(shù)從活性部分(Fr. AC-2)中檢測(cè)出9種綠原酸類似物,并通過HPLC方法進(jìn)一步分離。分離株為綠原酸(1)、隱綠原酸(2)、新綠原酸(3)、3,5-二咖啡??鼘幩幔?)、4,5-二咖啡??鼘幩幔?)、3,4-二咖啡??鼘幩幔?)、綠原酸甲酯(7)、隱綠原酸甲酯(8)、新綠原酸甲酯(9)?;衔?1-6 對(duì) HBV DNA 復(fù)制具有有效的活性,IC50 值在 5.5 ± 0.9-13.7 ± 1.3 μM 范圍內(nèi)。二咖啡酰類似物 (4-6) 也表現(xiàn)出對(duì) HBsAg 和 HBeAg 分泌的活性。酯化類似物(7-9)的抗HBV活性顯著降低,表明羧基與抗HBV活性密切相關(guān)。結(jié)論:本研究主要關(guān)注毛細(xì)蒿的活性部分及其活性組成,結(jié)果表明,F(xiàn)r. AC-2是毛細(xì)蒿的主要活性部分,綠原酸類似物是其抗HBV活性的主要成分。這些結(jié)果支持毛細(xì)血管青蒿作為抗HBV藥物的民族藥理學(xué)使用。
方法和結(jié)果:使用體外羥基自由基清除和醌還原酶誘導(dǎo)試驗(yàn),對(duì)植物膳食補(bǔ)充劑黑櫻莓 (Aronia melanocarpa) 的果實(shí)的乙酸乙酯可溶性提取物進(jìn)行生物活性引導(dǎo)分餾,分離出 27 種化合物,包括一種新的化合物 2-[(3,4-二羥基苯甲酰氧基)-4,6-二羥基苯基] 乙酸乙酯 (1),以及 26 種已知化合物 (2-27)。通過分析其物理和光譜數(shù)據(jù)([α](D)、NMR、IR、UV和MS)來鑒定分離化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)論:共計(jì)17種化合物(1-4、9、15-17和19-27)在羥基自由基清除試驗(yàn)中表現(xiàn)出顯著的抗氧化活性,其中金絲桃素(24, ED(50) = 0.17 μM)最有效。新化合物 (1, ED(50) = 0.44 μM) 在該測(cè)定中也表現(xiàn)出有效的抗氧化活性。黑桔子果實(shí)的三種成分在濃度<20μM時(shí)使醌還原酶活性加倍,即原兒茶酸[9,醌還原酶活性(CD)加倍所需的濃度=4.3μM],新綠原酸甲酯(22,CD = 6.7μM)和槲皮素(23,CD = 3.1μM)。
研究三葉赤霉莖的化學(xué)成分。方法和結(jié)果:采用柱層析法分離純化化合物,通過光譜技術(shù)和理化性質(zhì)測(cè)定其結(jié)構(gòu)。 從三葉赤霉菌莖中分離得到6種化合物,分別為隱綠原酸甲酯(1)、新綠原酸甲酯(2)、綠原酸甲酯(3)、3,5-二-O-咖啡??鼘幩峒柞ィ?)、3,4-二-O-咖啡??鼘幩峒柞ィ?)和4,5-二-O-咖啡??鼘幩峒柞ィ?)。結(jié)論:所有化合物均為首次從Akebia屬中分離得到。化合物 1,5 和 6 對(duì)α-葡萄糖苷酶具有明顯的抑制活性。
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王玲