RNA提取試劑盒(室溫型）
一、產(chǎn)品簡介。
本產(chǎn)品是一款不依賴冷凍離心機，可在室溫條件下快速提取 RNA 的試劑盒。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品常溫運輸與保存，有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 可以室溫條件下提取 RNA。
2. gDNA 去除柱可以有效去除基因組 DNA，得到高純度的 RNA。
3. 本試劑盒無需酚/ 氯仿抽提，顯著提高實驗操作的安全性。
四、自備試劑與耗材。
無水乙醇，RNase-free EP 管（1.5 mL）和槍尖。
五、使用說明。
1. 試劑配制：
a) Wash Buffer C（去蛋白液）配制。在去蛋白液中加入 21 mL 無水乙醇，混勻。
b) Wash Buffer D（漂洗液）配制。在漂洗液中加入 24 mL 無水乙醇，混勻。
2. 細胞裂解。
1) 細胞裂解。
a) 貼壁細胞裂解。PBS 洗滌 6 孔板中的貼壁細胞，加入 0.5 mL 裂解液，吹打混勻，轉移到 1.5 mL EP 管中，室溫靜置 3-5 min，保證細胞充分裂解。
b) 懸浮細胞裂解。離心法收集懸浮細胞，按照 5-10×106 個細胞加 0.5 mL 裂解液的比例加入裂解液，混勻，室溫靜置 3-5 min，保證細胞充分裂解。
2) 組織裂解。稱取 10-20 mg 組織，置于 EP 管中，加入 0.5 mL 裂解液，利用手持式電動勻漿儀對組織塊進行勻漿處理。或利用液氮冷凍組織塊，經(jīng)研缽研磨成粉末后轉入 EP 管中，再加入 0.5 mL 的裂解液，用移液器輕輕混勻，室溫靜置 3-5 min，保證組織充分裂解。
3. 沉淀。細胞裂解液或組織裂解液用離心速度（12,000 × g）離心 5 min，上清轉移至新的離心管，棄沉淀。
4. 將上清液加入 gDNA 去除柱，12,000×g，離心 30 sec，棄 gDNA 去除柱，保留濾液（含有 RNA）。
5. 加入與濾液等體積的無水乙醇，混勻，轉入 RNA 純化柱中，12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。
6. 剩余上清加入對應的 RNA 純化柱，12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。
7. 向 RNA 純化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer C（去蛋白液），12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。
8. 向 RNA 純化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer D（漂洗液），12,000 × g，離心 2 min，棄濾液。
9. 將 RNA 純化柱插入新的 RNase-free EP 管中，向柱中央滴加 100 μl Elution Buffer R（洗脫液）或RNase-free ddH2O，室溫靜置 2 min，
10. 12,000× g，離心 2 min，得到 RNA 溶液。
11. 立即用于反轉錄等實驗，或保存于-80 ℃冰箱。
六、注意事項。
1. 本產(chǎn)品可在常溫條件下提取 RNA，也可在低溫條件下提取 RNA，但裂解步驟需在常溫進行，因為裂解液低溫時渾濁，影響實驗效果。
2. 為了您的健康，請穿好實驗服，并佩戴乳膠手套和安全眼鏡。
注意：
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
關鍵字： RNA提取;快速提取RNA;
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