RNA提取試劑盒(室溫型）

一、產(chǎn)品簡介。

本產(chǎn)品是一款不依賴?yán)鋬鲭x心機(jī)，可在室溫條件下快速提取 RNA 的試劑盒。

二、運(yùn)輸與存儲條件。

本產(chǎn)品常溫運(yùn)輸與保存，有效期 12 個月。

三、特點(diǎn)與優(yōu)勢。

1. 可以室溫條件下提取 RNA。

2. gDNA 去除柱可以有效去除基因組 DNA，得到高純度的 RNA。

3. 本試劑盒無需酚/ 氯仿抽提，顯著提高實(shí)驗(yàn)操作的安全性。

四、自備試劑與耗材。

無水乙醇，RNase-free EP 管（1.5 mL）和槍尖。

五、使用說明。

1. 試劑配制：

a) Wash Buffer C（去蛋白液）配制。在去蛋白液中加入 21 mL 無水乙醇，混勻。

b) Wash Buffer D（漂洗液）配制。在漂洗液中加入 24 mL 無水乙醇，混勻。

2. 細(xì)胞裂解。

1) 細(xì)胞裂解。

a) 貼壁細(xì)胞裂解。PBS 洗滌 6 孔板中的貼壁細(xì)胞，加入 0.5 mL 裂解液，吹打混勻，轉(zhuǎn)移到 1.5 mL EP 管中，室溫靜置 3-5 min，保證細(xì)胞充分裂解。

b) 懸浮細(xì)胞裂解。離心法收集懸浮細(xì)胞，按照 5-10×106 個細(xì)胞加 0.5 mL 裂解液的比例加入裂解液，混勻，室溫靜置 3-5 min，保證細(xì)胞充分裂解。

2) 組織裂解。稱取 10-20 mg 組織，置于 EP 管中，加入 0.5 mL 裂解液，利用手持式電動勻漿儀對組織塊進(jìn)行勻漿處理?；蚶靡旱鋬鼋M織塊，經(jīng)研缽研磨成粉末后轉(zhuǎn)入 EP 管中，再加入 0.5 mL 的裂解液，用移液器輕輕混勻，室溫靜置 3-5 min，保證組織充分裂解。

3. 沉淀。細(xì)胞裂解液或組織裂解液用離心速度（12,000 × g）離心 5 min，上清轉(zhuǎn)移至新的離心管，棄沉淀。

4. 將上清液加入 gDNA 去除柱，12,000×g，離心 30 sec，棄 gDNA 去除柱，保留濾液（含有 RNA）。

5. 加入與濾液等體積的無水乙醇，混勻，轉(zhuǎn)入 RNA 純化柱中，12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。

6. 剩余上清加入對應(yīng)的 RNA 純化柱，12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。

7. 向 RNA 純化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer C（去蛋白液），12,000 × g，離心 30 sec，棄濾液。

8. 向 RNA 純化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer D（漂洗液），12,000 × g，離心 2 min，棄濾液。

9. 將 RNA 純化柱插入新的 RNase-free EP 管中，向柱中央滴加 100 μl Elution Buffer R（洗脫液）或RNase-free ddH2O，室溫靜置 2 min，

10. 12,000× g，離心 2 min，得到 RNA 溶液。

11. 立即用于反轉(zhuǎn)錄等實(shí)驗(yàn)，或保存于-80 ℃冰箱。

六、注意事項。

1. 本產(chǎn)品可在常溫條件下提取 RNA，也可在低溫條件下提取 RNA，但裂解步驟需在常溫進(jìn)行，因?yàn)榱呀庖旱蜏貢r渾濁，影響實(shí)驗(yàn)效果。

2. 為了您的健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服，并佩戴乳膠手套和安全眼鏡。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。