RNA 提取試劑盒 （純化柱型）
一、產品簡介。
RNA 提取試劑盒（純化柱型）是一款利用 RNA 純化柱與相關裂解-漂洗緩沖液組成的 RNA 提取系統(tǒng)，同時利用 gDNA 去除柱去除基因組 DNA，快速提取高純度的 RNA。
二、運輸與存儲條件。
本產品常溫運輸與保存，有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本產品可以快速（20 min）提取 RNA。
2. gDNA 去除柱可以有效去除基因組 DNA，得到高純度的 RNA。
3. 本試劑盒無需酚/ 氯仿抽提，及氯化鋰或異丙醇沉淀，顯著提高實驗操作的安全性。
四、自備試劑與耗材。
無水乙醇，70%乙醇，RNase-free EP 管（1.5 mL）和槍尖。
五、使用說明。
1. 試劑配制。在 Wash Buffer B（漂洗液）中加入 35 mL 無水乙醇，混勻。
2. 細胞和組織裂解。
1) 細胞裂解。
a) 貼壁細胞裂解。胰酶消化法收集細胞并計數(shù)，按照細胞數(shù)量添加一定體積的裂解液，混勻，室溫裂解 3 min。或根據(jù)細胞培養(yǎng)皿大小，直接加入裂解液，吹打混勻，轉移到 EP 管中，室溫裂解 3 min。
b) 懸浮細胞裂解。離心收集懸浮細胞并計數(shù)，按照細胞數(shù)目添加一定體積的裂解液，混勻，室溫裂解 3 min。
2) 動物組織裂解。組織塊稱重后加入液氮冷凍，研磨成粉末后轉入 EP 管，加入裂解液，劇烈震蕩（vortex）20 秒；或將組織塊加入裂解液中，利用手持式勻漿器破碎組織，室溫裂解 3 min，再12,000×g，4℃離心 3 min，棄沉淀，上清轉移至新的 EP 管，即為組織裂解液。
3. 將細胞裂解液或組織裂解液上清轉入 gDNA 去除柱，12, 000×g，4℃離心 30 sec，棄 gDNA 去除柱，保留濾液（含有 RNA）。
4. 向濾液中加入等體積的 70%乙醇，混勻，轉入 RNA 純化柱，12,000×g，4℃離心 30 sec，棄濾液。
5. 向 RNA 純化柱中加入 500 μL Wash Buffer A（去蛋白液），12,000×g，4℃離心 30 sec，棄濾液。
6. 向 RNA 純化柱中加入 500 μL Wash Buffer B（漂洗液），12,000×g，4℃離心 2 min，棄濾液。
7. 將 RNA 純化柱插入新的 RNase-free 的 EP 管中，向柱中央滴加 100 μL Elution Buffer R （洗脫液）或 RNase-free ddH2O，室溫靜置 2 min。
8. 12,000×g，4℃離心 2 min，得到 RNA 溶液，立即用于反轉錄實驗，或保存于-80 ℃冰箱中。
六、注意事項。
1. RNA 易降解，請在低溫條件下提取 RNA。
2. 本產品提取的 RNA 包括 28 s 和 18 s RNA，不含 5 s RNA。因此，本產品不用于 microRNA 提取。
關鍵字： RNA提取;純化柱型;離心柱型;
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