DNA PULLDOWN試劑盒
中文名稱 | DNA PULLDOWN試劑盒 |
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中文同義詞 | DNA PULLDOWN試劑盒 |
英文名稱 | DNA pulldown Kit |
英文同義詞 | DNA pulldown Kit |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關(guān)類別 | 表觀遺傳;表觀遺傳試劑盒 |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
DNA PULLDOWN試劑盒 性質(zhì)
現(xiàn)有研究DNA-蛋白相互作用的技術(shù)方案有多種,如酵母單雜交(Y1H)方法、ChIP-seq方法、凝膠遷移實驗(EMSA)和DNA pulldown方法。DNA pulldown方法是一種非常重要的蛋白質(zhì)-DNA相互作用的研究方法。該方法可以在同一個樣品中分離DNA-蛋白復(fù)合體。通常,是通過高親和性的標簽(如生物素)標記DNA,標簽的目的是固定DNA,通過瓊脂糖珠子或磁珠可以分離出生物素化的DNA,從而分離出細胞裂解液中的DNA-蛋白復(fù)合體。分離出的蛋白進行洗脫后可以通過Western Blot進行檢測,或通過質(zhì)譜進行篩選S1、磁珠預(yù)處理:使用BSA(牛血清白蛋白)和寡核苷酸隨機引物封閉鏈霉親和素標記的磁珠;S2、制備探針?磁珠復(fù)合物;S3、提取并預(yù)處理細胞核蛋白:向提取核蛋白樣品中加入脫氧核糖核酸酶孵育,再加入磁珠孵育,去除磁珠,收集上清;S4、pulldown;S5、蛋白樣品的收集。DNA pulldown是一種用于研究DNA與蛋白質(zhì)互作的技術(shù)。通常用來分析目標基因調(diào)控區(qū)域相結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子及其他調(diào)控蛋白。針對目標區(qū)域設(shè)計脫硫生物素標記的特異性DNA探針,并與細胞核提取物孵育。通過偶聯(lián)磁珠,經(jīng)洗脫,得到目的DNA探針-蛋白質(zhì)復(fù)合物。最后采用Western Blot或質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)類型。