背景[1-6]
人臍帶血單核細(xì)胞分離自正常人胎盤臍帶組織。其中，臍帶血單核細(xì)胞主要功能：（1）血液中的單核細(xì)胞是體積的白細(xì)胞。來源于骨髓髓系干細(xì)胞，隨血液循環(huán)遷移至全身各器官組織中定位，并分化成為各種類型巨噬細(xì)胞。（2）單核細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。它通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。
臍帶血單個(gè)核細(xì)胞（Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell,UCBMC)是臍帶血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。單核細(xì)胞（Mo）是在血液中循環(huán)的未成熟的吞噬細(xì)胞。作為一種遞呈抗原的免疫細(xì)胞，他們能吞噬和降解微生物和顆粒物質(zhì)。
單核細(xì)胞能夠分化為幾類不同的細(xì)胞類型。單核細(xì)胞最常見的應(yīng)用是體外分化成為單核細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞（moDC），巨噬細(xì)胞和成骨細(xì)胞以及它們作為吞噬免疫細(xì)胞在免疫學(xué)和感染生物學(xué)方面的作用。
單核細(xì)胞（monocytes）是血液中的血細(xì)胞，也是體積的白細(xì)胞，是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。單核細(xì)胞來源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育，當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。目前認(rèn)為它是巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的前身，具有明顯的變形運(yùn)動(dòng)，能吞噬、清除受傷、衰老的細(xì)胞及其碎片。
單核細(xì)胞還參與免疫反應(yīng)，在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉(zhuǎn)交給淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的特異性免疫性反應(yīng)。單核細(xì)胞也是對(duì)付細(xì)胞內(nèi)致病細(xì)菌和寄生蟲的主要細(xì)胞防衛(wèi)系統(tǒng)，還具有識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細(xì)胞總數(shù)百分比發(fā)生變化，因此檢查單核細(xì)胞計(jì)數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。
應(yīng)用[7][8]
可用于人臍血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)大鼠腓腸肌失神經(jīng)損傷的治療作用研究：
可制備大鼠坐骨神經(jīng)離斷后的腓腸肌萎縮模型,研究人臍血單個(gè)核細(xì)胞(CB-MNCs)肌肉多點(diǎn)注射對(duì)損傷的治療效果。方法采集并制備新鮮人CB-MNCs;將30只4～6周齡Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Normal組,n=10)、CB-MNCs治療組(Therapy組,n=10)和生理鹽水治療組(NS組,n=10),Therapy組和NS組大鼠離斷坐骨神經(jīng),建立腓腸肌萎縮模型;在造模后第7天、第14天和第21天,分3次將CB-MNCs或等體積生理鹽水多點(diǎn)注射到腓腸肌損傷局部,觀察大鼠行動(dòng)能力改變和足弓壞疽發(fā)展情況,并于第28天取樣測(cè)定腓腸肌濕重比、肌肉橫截面積,以及血液和腓腸肌中氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)、炎性因子水平和凋亡相關(guān)基因的表達(dá),觀察肌肉組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-α(VEGF-α)、α-肌動(dòng)蛋白(α-actin)和肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(Dystrophin)的表達(dá)變化。
結(jié)果：Therapy組大鼠足部壞疽面積和水腫程度明顯比NS組減輕(P=0.002),而且Therapy組中腓腸肌濕重比較NS組升高(P<0.001);病理切片顯示,Normal組、NS組和Therapy組肌肉橫截面積分別為(12 452.0±202.8)、(6 287.0±142.2)和(8 193.0±115.5)μm2,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與NS組相比,Therapy組血清和肌肉肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量明顯降低,超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)含量明顯增高(P<0.001)。
Therapy組較NS組半胱天冬酶-3(Caspase-3)、促凋亡基因Bax、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的mRNA表達(dá)量降低,抑凋亡基因Bcl-2、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、α-actin、Dystrophin和VEGF-α的mRNA表達(dá)量增高(P<0.05)。與NS組相比,Therapy組α-actin、Dystrophin和VEGF-α蛋白表達(dá)均增高(P<0.05)。免疫組化發(fā)現(xiàn),NS組和Therapy組Dystro-phin表達(dá)均增加,但Therapy組明顯高于NS組(P<0.05)。結(jié)論肌肉注射CB-MNCs可有效促進(jìn)腓腸肌失神經(jīng)損傷的傷口愈合,緩解萎縮、促進(jìn)肌肉修復(fù),并降低凋亡細(xì)胞比例。
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