背景及概述^[1]

人腎成纖維細胞分離自腎組織。人腎成纖維細胞是腎臟結(jié)締組織中最重要的細胞類型，在體外培養(yǎng)中，一般大致成梭形、多角形或不規(guī)則形等，為貼壁生長型細胞。剛分離的人腎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。人腎成纖維細胞主要功能有：①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變。

相關(guān)研究^[2-5]

有實驗研究大黃素對人腎成纖維細胞增殖的影響。在體外人腎成纖維細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，采用3HTdR摻入法觀察了不同濃度大黃素(10、30、50、80、100μg/ml)對人腎成纖維細胞3HTdR摻入率的影響。同時，利用流式細胞儀觀察了大黃素(10、50、100μg/ml)對細胞周期的影響。結(jié)果顯示大黃素以劑量依賴方式降低了人腎成纖維細胞3HTdR摻入率(r=0995，P001)。大黃素(50和100μg/ml)抑制了人腎成纖維細胞細胞周期的進程(P001)。因此大黃素通過抑制細胞DNA合成，延遲細胞周期的進程，抑制了細胞增殖，這一結(jié)果為大黃素的臨床應(yīng)用提供了部分實驗依據(jù)。

此外，有研究觀察漢防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙3種中藥成分對人腎成纖維細胞（KFB）的影響。方法采用ELISA法、四甲基偶氮唑藍（MTT）法、流式細胞儀、免疫組織化學(xué)法分別檢測漢防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙對人KFB分泌的I型膠原酶活性、人KFB增殖、凋亡、I型膠原表達的影響。結(jié)果漢防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙3種中藥提取成分在各自的濃度范圍和作用時間內(nèi)均能提高人胎KFB分泌的I型膠原酶活性、抑制人胎KFB增殖和Ⅰ型膠原的表達、促進人胎KFB凋亡。結(jié)論漢防己甲素、川芎嗪苦杏仁甙在預(yù)防及逆轉(zhuǎn)腎間質(zhì)纖維化中起重要作用。

還有實驗研究三七總甙(PNS)對人腎成纖維細胞(KFB)增殖、分泌I型膠原、表達整合素β1的影響。方法：體外培養(yǎng)KFB，分別采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法、ELISA法、流式細胞儀檢測PNS對KFB增殖、分泌Ⅰ型膠原及表達整合素β1的影響。結(jié)果：PNS在濃度范圍和作用時間內(nèi)可明顯抑制KFB細胞增殖及分泌Ⅰ型膠原(與空白對照組比較，P005)，同時顯著降低了KFB上整合素β1的表達(與空白對照組比較，P005)。因此PNS可成為防治腎間質(zhì)纖維化的有效藥物。

此外，有研究觀察血管緊張素II(AngII)對人腎成纖維細胞(KFB)的影響?！》椒ǎ翰捎肊LISA法、四甲基偶氮唑藍(MTT)法、流式細胞儀、免疫組織化學(xué)法分別檢測AngⅡ?qū)FB分泌的膠原酶活性、KFB增生、凋亡、I型膠原表達的影響。結(jié)果AngII能提高KFB分泌的總膠原酶活性、促進KFB增生、抑制KFB凋亡、促進KFBI型膠原的表達。因此AngⅡ能通過促進KFB增生、抑制KFB凋亡、促進KFBI型膠原的表達來促進腎間質(zhì)纖維化。

主要參考資料

[1] 運動解剖學(xué)、運動醫(yī)學(xué)大辭典

[2] 大黃素對人腎成纖維細胞增殖的影響

[3] 漢防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙對人腎成纖維細胞的影響

[4] 三七總甙對人腎成纖維細胞的影響

[5] 血管緊張素Ⅱ?qū)θ四I成纖維細胞的影