背景[1-7]
Nestin抗體(小鼠單抗)是用人工合成的人nestin羧基端附近包含150個(gè)氨基酸的一段多肽作為抗原制備而成的抗nestin小鼠單克隆抗體?？寺√?hào)為10c2。Nestin，中文名為巢蛋白，是胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)祖細(xì)胞(progenitor cell)的主要中間纖維(intermediate filament)蛋白。Nestin在大腦發(fā)育過程中高表達(dá)，但在大腦發(fā)育成熟后表達(dá)量會(huì)急劇下降，被神經(jīng)纖維(neurofilament)蛋白所替代。
由于nestin在神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞及它們的前體細(xì)胞中都有表達(dá)，并且nestin在發(fā)育的大腦和受損傷的大腦和脊髓中都有表達(dá)，因此nestin被廣泛用作神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells)或神經(jīng)祖細(xì)胞(neural progenitor cells)的分子標(biāo)記。Nestin在膠質(zhì)瘤(glioma)，神經(jīng)母細(xì)胞瘤(neuroblastomas)等不同的神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，因此nestin也被廣泛作為神經(jīng)腫瘤干細(xì)胞(neural cancer stem cells)的分子標(biāo)記。
由于Nestin在其它類型細(xì)胞中也有表達(dá)，以nestin作為分子標(biāo)記進(jìn)行判定的時(shí)候還能同時(shí)結(jié)合其它指標(biāo)。Nestin是肌肉發(fā)育過程中動(dòng)態(tài)微絲網(wǎng)絡(luò)的組成部分，可以聚合Desmin和Vimentin。Nestin與Vimentin和α-internexin形成異源復(fù)合物，并進(jìn)一步裝配成中間纖維。在快速生長(zhǎng)過程中，nestin特異表達(dá)在神經(jīng)上皮干細(xì)胞(neuroepithelial stem cells)、膠質(zhì)瘤(glioma)細(xì)胞和腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞中。Nestin在神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)過程中分布在生長(zhǎng)錐(growth cone)，可能和生長(zhǎng)錐的導(dǎo)向(guidance)有關(guān)。
Nestin是神經(jīng)干細(xì)胞的蛋白質(zhì)標(biāo)記物，也在卵泡干細(xì)胞及其直接分化后代中表達(dá)。毛囊凸起區(qū)域是活躍生長(zhǎng)的多能成體干細(xì)胞的豐富，易于獲得的來源。綠色熒光蛋白（GFP），其表達(dá)由轉(zhuǎn)基因小鼠中的巢蛋白調(diào)節(jié)元件驅(qū)動(dòng)，用于標(biāo)記毛囊干細(xì)胞。這些細(xì)胞可在體外分化為神經(jīng)元，神經(jīng)膠質(zhì)，角質(zhì)形成細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞和黑素細(xì)胞。因此，毛囊干細(xì)胞提供了有效的，可接近的自體干細(xì)胞來源，用于治療周圍神經(jīng)損傷。最近，Nestin作為檢測(cè)新形成的內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記受到關(guān)注。巢蛋白是結(jié)腸直腸癌組織中增殖的內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成標(biāo)志物。
應(yīng)用[8][9]
Nestin抗體(小鼠單抗)可用于研究癌癥的表達(dá)與分布特征：
在巢蛋白在喉癌的表達(dá)與分布特征研究中探討巢蛋白在喉鱗癌中的表達(dá)及分布狀況,檢測(cè)其表達(dá)水平及其與臨床分期、TNM分期、分化程度、分型等臨床病理參數(shù)的關(guān)系。方法用免疫組織化學(xué)(即用型快捷免疫組化,MaxVisionTM/HRP法,DAB染色)的方法,通過檢測(cè)巢蛋白及CD31在10例喉鱗癌(LSCC)組織和10例癌旁組織(對(duì)照組)中的表達(dá),通過imageJ的免疫組化插件IHCProfiler作組織切片的光密度(OD)定量,并且收集10例喉鱗癌患者詳細(xì)的臨床資料,分析巢蛋白及CD31的表達(dá)及與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系。
結(jié)果在10例喉鱗癌組織及10例癌旁組織中,巢蛋白表達(dá)于結(jié)締組織中的血管內(nèi)皮的細(xì)胞質(zhì),IHC染色下呈淺至深棕黃色,絕大多數(shù)癌細(xì)胞未見陽性,血管壁的平滑肌纖維陰性;在癌旁的骨骼肌纖維,可見呈表達(dá)的陽性的肌纖維細(xì)胞。在喉癌組織部位,癌細(xì)胞成團(tuán)分布在結(jié)締組織中。癌細(xì)胞核著色大多較淺,密集分布,細(xì)胞核較大,且大小不一,有些癌細(xì)胞團(tuán)中央可見無細(xì)胞核的癌珠。
在癌細(xì)胞團(tuán)之間,可見結(jié)締組織,即癌組織的間質(zhì),其細(xì)胞核著色較深,分布較稀疏,或有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),細(xì)胞核著色較深,較小或分葉。結(jié)果在10例喉鱗癌組織及10例癌旁組織中,巢蛋白表達(dá)于結(jié)締組織中的血管內(nèi)皮的細(xì)胞質(zhì),IHC染色下呈淺至深棕黃色,絕大多數(shù)癌細(xì)胞未見陽性,血管壁的平滑肌纖維陰性;在癌旁的骨骼肌纖維,可見呈表達(dá)的陽性的肌纖維細(xì)胞。
在喉癌組織部位,癌細(xì)胞成團(tuán)分布在結(jié)締組織中。癌細(xì)胞核著色大多較淺,密集分布,細(xì)胞核較大,且大小不一,有些癌細(xì)胞團(tuán)中央可見無細(xì)胞核的癌珠。在癌細(xì)胞團(tuán)之間,可見結(jié)締組織,即癌組織的間質(zhì),其細(xì)胞核著色較深,分布較稀疏,或有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),細(xì)胞核著色較深,較小或分葉。
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