雙甘肽(Glycylglycine,Gly-Gly)是一種簡單的二肽,由兩個甘氨酸分子通過肽鍵連接而成,是白色固體,通常以粉末形式存在。雙甘肽具有氨基基團(tuán)和羧基基團(tuán),因此可以表現(xiàn)出酸堿性。在水中,它可以作為兩個氨基酸殘基的共軛酸和堿,可以接受或釋放質(zhì)子。雖然雙甘肽通常在生物體內(nèi)不扮演重要的生物學(xué)角色,但它在實驗室研究中經(jīng)常被用作模擬肽鏈的部分結(jié)構(gòu),以研究蛋白質(zhì)折疊、酶活性、分子相互作用等生物化學(xué)過程。
雙甘肽的分析和檢測可以用于生物醫(yī)學(xué)研究中,例如在血漿或尿液中檢測它的濃度可能與某些代謝性疾病或腎臟功能有關(guān),有助于疾病的診斷和監(jiān)測。本文將介紹一種檢測血漿中雙甘肽濃度的方法[1]。
檢測步驟
血漿樣品處理:取血漿樣品,加入內(nèi)標(biāo)工作液混合后再加入1% FA/ACN混合后離心處理;離心處理后取上清液至磷脂去除板,放置于正壓萃取裝置上施加正壓,收集萃取液并轉(zhuǎn)移至EP管,于氮?dú)饬飨麓蹈刹?fù)溶;
固相萃?。簩⑸鲜鲅獫{樣品處理步驟中復(fù)溶后的樣品裝載于固相萃取柱上進(jìn)行固相萃取并洗脫,收集洗脫液至EP管,于氮?dú)饬飨麓蹈刹?fù)溶,然后離心處理,取上清液作為待測樣品;
儀器檢測:使用LC-MS/MS儀器對上述待測樣品進(jìn)行檢測。液相色譜的檢測條件為:流動相A為0.1%的FA/H2O,流動相B為ACN,柱溫40℃,進(jìn)樣體積為2.00μL,流速為0.3mL/min,梯度洗脫15min;雙甘肽保留時間為7.8min。
此方法能夠快速、準(zhǔn)確地對血漿中雙甘肽的濃度進(jìn)行檢測,且能夠有效降低血漿基質(zhì)效應(yīng),其雙甘肽最低定量限為15.625ng/mL,靈敏度高,專屬性強(qiáng),樣品用量及進(jìn)樣量小,適用于大批量樣本檢測。
參考文獻(xiàn)
[1] 一種測定血漿中雙甘肽濃度的方法. CN117517541A.