背景^[1-3]

HELA人宮頸癌細胞是一種來自人體組織的非整倍體上皮樣細胞系，由Gey GO等在1951年從一名31歲女性黑人的宮頸癌組織中建立。這種細胞系具有高度增殖能力和穩(wěn)定生長特性，常用于宮頸癌的研究和治療。HELA人宮頸癌細胞系內(nèi)部存在不同分化狀態(tài)的細胞，這使得研究者可以對比研究細胞的分化過程和細胞信號通路的調(diào)控。此外，HELA人宮頸癌細胞具有多種基因突變，對某些治療藥物敏感，因此在藥物篩選和臨床試驗中具有重要意義。

在科研領域，HELA人宮頸癌細胞被廣泛用于癌癥研究、生物學研究以及疫苗和藥物研發(fā)。它們可以用于體外藥物篩選和疫苗研制，也可以用于研究宮頸癌的發(fā)病機制和傳播途徑。此外，HELA人宮頸癌細胞還可以用于制備抗體和其他生物分子，為生物醫(yī)學研究提供了重要的工具和資源。

HELA人宮頸癌細胞

HELA人宮頸癌細胞是一種常用的腫瘤細胞系，它是由人類宮頸癌組織中分離出來的。HELA細胞具有以下特點：

1.高度惡性：HELA細胞具有高度的惡性和侵襲性，可以快速生長和擴散。這使得HELA細胞成為研究腫瘤生物學和抗腫瘤藥物篩選的重要模型。

2.易于培養(yǎng)：HELA細胞生長迅速，可以在常規(guī)培養(yǎng)條件下進行快速擴增。這使得HELA細胞成為實驗室中常用的腫瘤細胞系之一。

3.豐富的生物學信息：HELA細胞具有豐富的生物學信息，包括基因表達譜、蛋白質(zhì)組學特征等。這使得HELA細胞成為研究腫瘤發(fā)生和發(fā)展機制的重要模型。

4.廣泛的應用：HELA細胞被廣泛應用于腫瘤生物學、分子生物學、藥物篩選等領域的研究。例如，HELA細胞被用于研究腫瘤細胞的增殖、凋亡、轉移等生物學過程，以及抗腫瘤藥物的篩選和評價等。

然而，在使用HELA人宮頸癌細胞的過程中也引發(fā)了一些倫理和隱私權的爭議，因為這些細胞是從一位并不知情的女性身上獲取的。因此，在使用HELA人宮頸癌細胞進行科學研究時，必須充分考慮和尊重倫理和隱私問題。

應用^[4][5]

HELA人宮頸癌細胞可以用于CYB5D2基因對人宮頸癌細胞HeLa增殖、侵襲轉移中的抑制作用及其機制初步研究

檢測CYB5D2蛋白在宮頸組織中的表達情況,分析CYB5D2表達水平與宮頸癌臨床病理參數(shù)及生存預后的關系,及其與上皮細胞間質(zhì)轉化反應(epithelial-mesen chymal transitions,EMT)代表性標志物E-cadherin的相關性,初步探討CYB5D2在宮頸癌侵襲轉移過程中臨床意義。進一步研究過表達CYB5D2基因對人宮頸癌HeLa細胞增殖、侵襲轉移中的影響及潛在的分子機制,以期為臨床探索宮頸癌基因治療提供新的靶向位點。

方法:(1)免疫熒光實驗檢測CYB5D2和E-cadherin在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌組織中的表達情況及其臨床意義;

(2) 本研究中HELA人宮頸癌細胞分為過表達CYB5D2實驗組和空載對照組,Western blot和qRT-PCR實驗檢測各組HeLa細胞中CYB5D2蛋白及mRNA表達情況;

(3) MTS法、平板克隆形成實驗檢測過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞增殖能力的影響;

(4) 流式細胞術檢測過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞周期的影響;

(5) 劃痕實驗檢測過表達CYB5D2在HELA人宮頸癌細胞遷移率的變化,從而反應對細胞遷移能力的影響;

(6) Transwell侵襲實驗檢測過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞侵襲的影響;

(7) ELISA實驗檢測過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞上清中分泌MMP2、MMP9的影響;

(8) Western blot實驗檢測過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞EMT損傷反應相關蛋白E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2的變化。

結果:(1)免疫熒光結果顯示,與19例正常宮頸組織、23例宮頸上皮內(nèi)瘤變組織相比,CYB5D2和E-cadherin蛋白在99例宮頸癌組織中表達水平顯著減弱(P<0.05);二者在不同類型的宮頸組織中表達均呈正相關(P<0.05);CYB5D2的表達與腫瘤的臨床FIGO分期有關(P<0.05),E-cadherin的表達與腫瘤浸潤深度、分化程度、臨床FIGO分期有關(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析顯示,高表達CYB5D2 mRNA宮頸癌患者OS及RFS顯著增加(P<0.05);

(2) Western blot和qRT-PCR結果顯示,與空載對照組細胞相比,實驗組HELA人宮頸癌細胞內(nèi)CYB5D2蛋白及mRNA表達水平顯著升高(P<0.05);

(3) MTS結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HELA人宮頸癌細胞增殖速度、細胞數(shù)量明顯低于對照組(P<0.05);平板克隆形成實驗結果顯示,過表達CYB5D2實驗組細胞集落形成數(shù)目、集落大小明顯低于對照組(P<0.05);

(4) 流式細胞術結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HELA人宮頸癌細胞中處于G0/G1、G2/M、S期細胞占比變化不大(P>0.05);

(5) 細胞劃痕實驗結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HELA人宮頸癌細胞平均遷移率顯著低于對照組(P<0.05);

(6) Transwell侵襲實驗結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HeLa細胞發(fā)生侵襲的細胞數(shù)目顯著低于對照組(P<0.05);

(7) ELISA實驗結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HELA人宮頸癌細胞上清中MMP2、MMP9的分泌量顯著低于對照組(P<0.05);

(8) Western blot實驗結果顯示,過表達CYB5D2實驗組HELA人宮頸癌細胞中E-cadherin、β-catenin蛋白表達逐漸升高,N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2蛋白表達逐漸減少(P<0.05)。

結論:(1)在宮頸癌中,CYB5D2作為抑癌基因,有望成為評估宮頸癌患者預后標志物的潛在可能;

(2) 過表達CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞具有增殖抑制、遷移抑制、侵襲抑制作用;

(3)CYB5D2對HELA人宮頸癌細胞發(fā)揮抑制作用的機制可能通過調(diào)控E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Snail、Twist、Zeb2等蛋白及轉移相關因子MMP2、MMP9的表達,進而逆轉EMT反應的發(fā)生,從而在宮頸癌中作為抑癌基因來發(fā)揮潛在的生物學效應。

參考文獻

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