背景[1-3]
MT培養(yǎng)基是一種天然培養(yǎng)基,主要來源于動物體液或利用組織分離提取,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。在體外細胞培養(yǎng)技術(shù)建立的早期,MT培養(yǎng)基得到了廣泛的應(yīng)用。然而,由于其制作過程復(fù)雜且批間差異大,MT培養(yǎng)基逐漸被合成培養(yǎng)基所替代。盡管如此,目前MT培養(yǎng)基在特定應(yīng)用中仍具有不可或缺的作用,如促進細胞貼壁和某些特殊細胞的培養(yǎng)。
MT培養(yǎng)基的主要成分包括無機鹽、有機物和維生素。無機鹽如NH4NO3、KNO3、CaCl2、MgSO4、KH2PO4和FeSO4等,為植物細胞提供所需的礦質(zhì)元素,支持其生長和發(fā)育。有機物如葡萄糖、蔗糖、酵母提取物和胰酶水解物等,則為植物細胞提供碳源和氮源,促進細胞的代謝和生長。而維生素如硫胺素、吡哆醇、肌醇、核黃素和生物素等,同樣有助于植物細胞的代謝、生長、分化和增殖。
MT培養(yǎng)基
MT培養(yǎng)基的配方包含多種成分,具體如下:
1.無機鹽類:包括硝酸鉀、硝酸銨、磷酸二氫鉀等,這些成分提供植物生長必需的氮、磷等元素。
2.微量元素:如硫酸鎂、氯化鈣、碘化鉀、硼酸、硫酸錳、硫酸鋅和鉬酸鈉等,這些微量元素對植物的生長和發(fā)育至關(guān)重要。
3.有機物:可能包括葡萄糖、蔗糖、酵母提取物和胰酶水解物等,它們提供碳源和能量,支持植物細胞的生長和分化。
4.維生素和植物生長調(diào)節(jié)劑:這些成分可以調(diào)節(jié)植物細胞的分裂和生長,促進組織的發(fā)育。
MT培養(yǎng)基的配制方法一般涉及稱取一定量的培養(yǎng)基粉末于蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸溶解,調(diào)節(jié)pH值,然后分裝并進行高壓滅菌。具體的配制步驟和參數(shù)可能會根據(jù)具體的應(yīng)用和供應(yīng)商的指導(dǎo)而有所不同。
應(yīng)用[4][5]
MT培養(yǎng)基可以用于青枯菌培養(yǎng)特性及廣藿香抗病性鑒定方法的研究
廣藿香組培苗的培育以廣藿香的頂芽和葉片為材料,比較了兩者的出芽率和出芽數(shù)目。
結(jié)果表明:頂芽和葉片均能良好的誘發(fā)芽的發(fā)生,其中頂芽的出芽速度較快,10d的發(fā)芽率就達到了85.74%,培養(yǎng)時間到25d時,頂芽和葉片的發(fā)芽率均能達到100%;就單個外植體出芽數(shù)而言,葉片的出芽數(shù)比頂芽的出芽數(shù)要高的多,培養(yǎng)時間到30d時,葉片的出芽數(shù)目多達35.75。并對廣藿香在MT培養(yǎng)基和1/2MT培養(yǎng)基生長的性狀進行了比較,結(jié)果表明:1/2MT培養(yǎng)基雖然可以快速的生長,也容易使廣藿香苗較快的老化。
青枯菌的培養(yǎng)特性研究以NA作為青枯菌的培養(yǎng)液,根據(jù)回歸方程y=1.8662x-0.0458(R2=0.9904)的線性關(guān)系,考查了多個因子對青枯菌菌液濃度的影響。其結(jié)果表明:在培養(yǎng)時間不少于12h、溫度為30℃、pH為7左右、培養(yǎng)瓶中空氣含量60%以上,青枯菌的菌液濃度較高,其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也相對較高。
廣藿香抗青枯病離體鑒定方法的研究在MT培養(yǎng)基中加入適當(dāng)濃度的青枯菌粗毒素或者活菌,廣藿香的外植體和無根苗的生長受到不同程度的抑制。其結(jié)果表明:當(dāng)青枯菌菌液濃度梯度在0.31×108cfu/ml、0.38×108 cfu/ml、0.52×108 cfu/ml之間時,粗毒素對帶節(jié)莖再生芽的高度的抑制作用表現(xiàn)出明顯的差異;當(dāng)在MT培養(yǎng)基中加入濃度為1.34 cfu/ml青枯菌活菌時,無根苗的葉片枯萎率與培養(yǎng)基中NA培養(yǎng)液的含量成正相關(guān)性;低濃度的青枯菌粗毒素對無根苗的生根有抑制作用,高濃度粗毒素對無根苗的葉片有致萎作用,當(dāng)青枯菌菌液濃度為等于或者高于1.0314×108 cfu/ml時,無根苗的生根率為0;當(dāng)青枯菌菌液濃度為等于小于1.5473×108cfu/ml時,無根苗的葉片枯萎率為0。
參考文獻
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[2]Biology and Epidemiology of Bacterial Wilt Caused by Pseudomonas Solanacearum[J].A C Hayward.Annual Review of Phytopathology,1991
[3]Reassessment of Plant Wilt Toxins[J].N K Van Alfen.Annual Review of Phytopathology,1989
[4]A possible role in pathogenesis for the swelling of extracellular slime of Erwinia amylovora at increasing water potential[J].H.J.Schouten.Netherlands Journal of Plant Pathology,1989(1)
[5]劉星.青枯菌培養(yǎng)特性及廣藿香抗病性鑒定方法的研究[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué),2009.