銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B是銀杏中二萜內(nèi)酯類化合物，是一類特異有效的血小板活化因子受體拮抗劑。此外，銀杏總內(nèi)酯還包括銀杏內(nèi)酯C、銀杏內(nèi)酯J、銀杏內(nèi)酯M和白果內(nèi)酯等。銀杏總內(nèi)酯中各單體的藥效和功用存在一定差異。銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B對(duì)治療心腦血管疾病具有顯著療效。為開(kāi)發(fā)高效新藥，控制藥品質(zhì)量，有必要對(duì)銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B進(jìn)行高純度分離。

傳統(tǒng)的精制方法

文獻(xiàn)報(bào)道的銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B單體分離方法主要有醇類提取―溶劑萃取―柱色譜分離法，醇類提取―溶劑萃取―反相色譜分離法，色譜分離―重結(jié)晶法和超臨界流體萃取法(SCFE)等。

ZL00117758.3（《由銀杏葉或銀杏葉浸膏制備藥物銀杏內(nèi)酯A,B的方法》）：該方法是向銀杏葉或其浸膏加入乙醇等浸取劑，得到的浸取液經(jīng)過(guò)濾、分層，取出有機(jī)相去雜，然后經(jīng)濃縮、干燥獲得富集銀杏內(nèi)酯A和B，采用制備型液相色譜再分離A與B。該方法運(yùn)用制備色譜進(jìn)行分離，缺點(diǎn)在于制備銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B生產(chǎn)能力小，難于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。

ZL201010536023.6（《一種銀杏內(nèi)酯A的制備方法》）：其特征在于包含下列步驟：將銀杏葉粗提物用大孔反相吸附樹(shù)脂進(jìn)行柱層析分離，即可；其中，所述的大孔反相吸附樹(shù)脂的參數(shù)如下：粒徑為50-l00μm，孔徑為90-110A，樹(shù)脂骨架為聚苯乙烯―二乙烯苯。該制備方法缺點(diǎn)在于只分離得到銀杏葉中銀杏內(nèi)酯A，其它內(nèi)酯類成分被舍棄，提高了該工藝的成本，浪費(fèi)原料。

現(xiàn)有的方法中，有的只是得到一種銀杏內(nèi)酯A或銀杏內(nèi)酯B的單體成分，有的工藝流程較長(zhǎng)，不易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。因此，需要研究能同時(shí)純化銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B，適于工業(yè)化生產(chǎn)的精制方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B的精制方法。

本發(fā)明方法包括下列步驟：

（1）萃取：取銀杏葉提取物浸膏，加入有機(jī)溶劑進(jìn)行多次萃取，合并萃取液，回收溶劑至干，用含水乙醇定容至濃度為0.2-1.0g/ml；

（2）過(guò)柱層析富集：將上述藥液通過(guò)反相吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行富集，依次用不同濃度的含水乙醇進(jìn)行除雜、洗脫，分段收集洗脫液，分別將洗脫液濃縮至浸膏，分別得到銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B粗品；

（3）結(jié)晶：將上述銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B粗品浸膏用含水乙醇進(jìn)行多次重結(jié)晶，即得到高純度的銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B精制品。

本發(fā)明所得銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B含量分別為95-98%。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)主要在于：

①本方法通過(guò)乙酸乙酯萃取后，萃取液一次過(guò)柱即可分離銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B，提高原料的利用效率，節(jié)約成本。

②對(duì)銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的粗品分別進(jìn)行重結(jié)晶，提高了銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B單體的純度。

③將結(jié)晶后的母液合并后并入下一批藥液中繼續(xù)過(guò)柱富集，提高了銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B的回收率。

本方法用銀杏葉提取物為原料，工藝簡(jiǎn)單，減少損失，同時(shí)分離純化銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B。全過(guò)程除乙醇和乙酸乙酯外，不用其它有機(jī)溶劑，可實(shí)現(xiàn)溶劑回收利用的綠色生產(chǎn)。產(chǎn)品純度高，適于工業(yè)化生產(chǎn)，有較大的應(yīng)用價(jià)值。