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銀杏內(nèi)酯的提純

2020/10/21 8:45:43

銀杏內(nèi)酯(英文名:ginkgolide)化合物屬于萜類化合物,由倍半萜內(nèi)酯和二萜內(nèi)酯組成,是銀杏葉中一類重要的活性成分。白果內(nèi)酯(bilobalide;BB)屬倍半萜內(nèi)酯,是目前從銀杏葉中發(fā)現(xiàn)的唯一的一個(gè)倍半萜內(nèi)酯化合物。

銀杏內(nèi)酯A(ginkgolide A;GA)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B;GB)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolide C;GC)、銀杏內(nèi)脂M(ginkgolide M;GM)、銀杏內(nèi)脂J(ginkgolide J;GJ)為二萜類化合物,其差別在于含有的羥基數(shù)目和羥基連接的位置不同,具體如下圖所示。

銀杏內(nèi)酯的分子結(jié)構(gòu)

銀杏內(nèi)酯分子具有獨(dú)特的十二碳骨架結(jié)構(gòu) ,嵌有一個(gè)叔丁基和六個(gè)五元環(huán) ,包括一個(gè)螺壬烷 ,一個(gè)四氫呋喃環(huán)和三個(gè)內(nèi)酯環(huán)。銀杏酯對(duì)血小板活化因子(PAF)受體有強(qiáng)大的特異性抑制作用,其中銀杏內(nèi)酯的抗PAF活性最高。PAF是血小板和多種炎癥組織分泌產(chǎn)生的一種內(nèi)源性磷脂,是迄今發(fā)現(xiàn)的最有效的血小板聚集誘導(dǎo)劑,它與許多疾病的產(chǎn)生、發(fā)展密切相關(guān)。

而銀杏內(nèi)酯目前被認(rèn)為是最有臨床應(yīng)用前景的天然PAF受體拮抗劑,其拮抗作用活性與化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。當(dāng)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中R3為羥基或羥基數(shù)目增多時(shí),對(duì)PAF的拮抗活性減弱;而當(dāng)R2為羥基且R3為H時(shí),則活性顯著增強(qiáng),其中以銀杏內(nèi)酯B對(duì)PAF產(chǎn)生的操拮抗作用最強(qiáng),迄今對(duì)銀杏內(nèi)酯B的藥理作用研究也最為集中。

提純

銀杏內(nèi)酯的提取及純化方法有:溶劑萃取法、柱提取法、溶劑萃取-柱提取法、超臨界提取法及色譜或柱層析純化法等。銀杏提取物中內(nèi)酯類成分的含量測(cè)定可采用HPLC-UV法、HPLC-RI法、GC、HPLC-MS、NMR和生物測(cè)定方法等等,但因樣品前處理技術(shù)不足,或因靈敏度不夠,或穩(wěn)定性和選擇性相對(duì)較差,使結(jié)果均不太理想。

目前,報(bào)道最有效的分析方法為HPLC-ELSD法。檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(Evaporative Light-Scattering Detector,ELSD)。這是一種HPLC用的新通用質(zhì)量型檢測(cè)器,不受外部環(huán)境的干擾,流動(dòng)相在檢測(cè)器中全部揮發(fā),不干擾檢測(cè)。經(jīng)過(guò)線形實(shí)驗(yàn)、回收實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)等證明:ELSD檢測(cè)銀杏內(nèi)酯的靈敏度和穩(wěn)定性均能符合含量測(cè)定的要求,是一種較理想的簡(jiǎn)便實(shí)用的檢測(cè)方法。其缺點(diǎn)主要是載氣消耗較大。

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