DNA是主要的遺傳物質(zhì)，集中于染色體上。1924年孚爾根首先用席夫試劑(Schiff)作試驗(yàn)，鑒定了染色體上DNA的存在，故稱為孚爾根染色法。孚爾根染色法的反應(yīng)原理主要與席夫試劑的化學(xué)性質(zhì)有關(guān)，此試劑的基本成分是堿性品紅，偏亞硫酸氫鈉(NaHSO3)和鹽酸。

孚爾根染色原理

堿性品紅原為桃紅色，當(dāng)與亞硫酸作用時(shí)還原，使醌型變?yōu)楸叫?，由桃紅色變?yōu)闊o色透明的N-亞磺酸亞硫酸副品紅堿，當(dāng)它與醛基作用時(shí)，其分子式又恢復(fù)為醌型結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)紫紅色，利用1N HCl 、60℃下水解時(shí)，可將DNA分子中嘌呤堿基與去氧核糖之間的糖苷鍵打斷，使嘌呤脫下，并使去氧核糖C-1位置釋放醛基與席夫試劑反應(yīng)顯紫紅色。細(xì)胞中只有DNA才具有這種專一的孚爾根反應(yīng)，因此利用孚爾根反應(yīng)，可以鑒定DNA的存在。并廣泛應(yīng)用于核及染色體的研究中。

席夫試劑配制

稱1g堿性品紅于200ml煮沸的重蒸餾水中，5分鐘后斷電使其冷卻至55～50℃，過濾到一個(gè)棕色的試劑瓶中，加入1N HCl  20ml，繼續(xù)冷卻至25℃，加入1g偏亞硫酸氫鈉，搖動瓶子使其溶解。密閉瓶口，置黑暗低溫處或冰箱內(nèi)（4℃左右），18～24小時(shí)后檢查，試劑如透明無色或呈淺黃色時(shí)即可使用，這就是Schiff試劑溶液。如有不同程度的紅色未褪，可加入1g活性炭，強(qiáng)烈震蕩一分鐘，仍在低溫下靜置過夜，然后用濾紙過濾后使用。密封瓶口，包以黑紙，在5℃以下冰箱內(nèi)可以保存半年。

其它應(yīng)用

除去染色DNA，堿性品紅在生物學(xué)制片中用途很廣，可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復(fù)紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì)。在生物學(xué)制片中用來染維管束植物的木質(zhì)化壁，又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細(xì)菌學(xué)制片中，長用來鑒別結(jié)核桿菌。