背景[1-3]
伊紅染色液是一種常用于組織學(xué)和免疫組織化學(xué)研究中的染色試劑。其主要成分是伊紅染料,它可以溶于水或乙醇中形成染色液。在染色過(guò)程中,組織切片或細(xì)胞樣品首先需要被固定和脫水處理,然后浸泡在伊紅染色液中進(jìn)行染色。伊紅染色液的主要作用是與細(xì)胞和組織中的堿性成分結(jié)合,呈現(xiàn)出紅色或橙紅色的染色效果,使科研人員能夠更清晰地觀察到細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、細(xì)胞核以及其他細(xì)胞組分,進(jìn)而更好地理解細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。
此外,伊紅染色液在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用。醫(yī)生可以使用伊紅染色液對(duì)組織樣本進(jìn)行染色,從而在顯微鏡下觀察和分析組織的病理變化,如細(xì)胞的形態(tài)異常、組織的結(jié)構(gòu)紊亂等。這對(duì)于疾病的診斷和治療有著重要的意義。
伊紅染色液
使用伊紅染色液進(jìn)行染色時(shí),染色時(shí)間可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整,通常為幾分鐘到幾十分鐘不等。同時(shí),需要注意的是,染色液可以重復(fù)使用多次,但當(dāng)效果不佳時(shí)應(yīng)更換新的染色液。在首次使用前,建議先取少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。此外,為了保持染色液的質(zhì)量和效果,儲(chǔ)存條件也需要注意,一般應(yīng)存放在室溫下,并避免暴露在光線下,有效期通常為一年。
伊紅染色液是化學(xué)合成的染料,它在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,這些陰離子與蛋白質(zhì)的氨基(陽(yáng)離子)結(jié)合,從而使細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉和結(jié)締組織等染色成不同程度的紅色或粉紅色。這種染色特性使得伊紅成為蘇木精-伊紅(HE)染色法中的重要組成部分。在HE染色法中,蘇木精負(fù)責(zé)染細(xì)胞核,而伊紅則負(fù)責(zé)染細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)。
此外,伊紅染色的速度受pH值的影響,pH值越酸,染色速度越快。在日常工作中使用的伊紅染液通常是將0.8克醇溶性伊紅溶解在1000毫升的95%酒精中。
應(yīng)用[4][5]
伊紅染色液可以用于雞沙氏住白細(xì)胞蟲體染色技術(shù)的優(yōu)化
對(duì)湖南省雞沙氏住白細(xì)胞蟲病的流行病學(xué)、病原學(xué)、血液生化學(xué)等方面進(jìn)行深入研究,并對(duì)不同動(dòng)物模型感染性進(jìn)行了初步構(gòu)建,以期為沙氏住白細(xì)胞蟲的進(jìn)一步研究提供科學(xué)依據(jù)。
方法1.在雞沙氏住白細(xì)胞蟲配子體染色方面,采用12種不同染色方法:革蘭氏染色法、美藍(lán)染色法、抗酸染色法、瑞特氏染色法、姬姆薩染色法、復(fù)紅染色法、阿伯特染色法、瑞—姬混合染色法、立克次氏體染色法、梅古氏染色法、梅—姬染色法、伊紅染色液伊紅—亞甲基蘭染色法對(duì)雞沙氏住白細(xì)胞蟲配子體染色,并比較染色結(jié)果。
2. 在流行病學(xué)調(diào)查方面,通過(guò)血液涂片染色對(duì)湘西自治州雞沙氏住白細(xì)胞蟲感染情況,與雞品種、年齡、飼養(yǎng)管理情況進(jìn)行了深入研究;并對(duì)傳播媒介-蚋采用昆蟲網(wǎng)進(jìn)行捕捉、辨種,進(jìn)行初步研究。3.在不同動(dòng)物模型探討方面,采集患病雞只血液按照不同感染方式(腹腔接種、靜脈接種、皮下接種、混合接種)接種雛雞、雛鴨,觀察雞沙氏住白細(xì)胞蟲首現(xiàn)期、高峰期、消退起情況,高峰期配子體數(shù)目及雌雄配子體比例,配子體在外周血液中晝夜變化。4.在動(dòng)物感染后生化指標(biāo)的測(cè)定方面,對(duì)雛雞、雛鴨進(jìn)行每周體重測(cè)量,外周血液學(xué)指標(biāo)測(cè)定:感染后70天血清生化指標(biāo)測(cè)定、臟器重量的測(cè)量、臨床病理學(xué)檢查。
結(jié)果1.瑞—姬混合染色法、梅—姬染色法、伊紅染色液伊紅—亞甲基蘭染色法效果最好;其次為革蘭氏染色法、美藍(lán)染色法、瑞特氏染色法、姬姆薩染色法、梅古氏染色法、立克次氏體染色法等染色方法;抗酸染色法、復(fù)紅染色法、阿伯特染色法染色效果較差。美藍(lán)染色法由于其染色時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單、層次對(duì)比明顯、結(jié)構(gòu)完整性好,雖然高倍鏡下清晰度不高,但低倍鏡下檢出率高。瑞—姬混合染色法、梅—姬染色法、伊紅染色液伊紅—亞甲基蘭染色法為復(fù)染色法,雖然染色時(shí)間長(zhǎng),但層次對(duì)比明顯、結(jié)構(gòu)最完整、最清晰。
參考文獻(xiàn)
[1];F.Kobayashi;;T.Tsuji.Parasitology Research,1996(5)
[2]Protection against Chicken Leucocytozoonosis Provided by Immunization with Spleen Homogenate Infected with Leucocytozoon caulleryi[J]..Avian Diseases,1991(3)
[3]HEMATOZOA OF WILD TURKEYS FROM THE MIDWESTERN UNITED STATES:TRANSLOCATION OF WILD TURKEYS AND ITS POTENTIAL ROLE IN THE INTRODUCTION OF PLASMODIUM KEMPI[J].Marc D.Castle;;Bruce M.Christensen.Journal of Wildlife Diseases,1990(2)
[4]Protective immunity to Leucocytozoon caulleryi in chickens by a killed vaccine[J].T.Morii;;J.Fujita;;K.Akiba;;T.Isobe;;K.Nakamoto;;Masubuchi;;H.Ishihara.Parasitology Research,1990(7)
[5]奉佳.雞沙氏住白細(xì)胞蟲體染色技術(shù)的優(yōu)化[D].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.