背景^[1-3]

B5培養(yǎng)基是一種特殊的培養(yǎng)基配方，主要用于培養(yǎng)雙子葉植物，尤其是木本植物的生長。它的特點是銨鹽含量較低，硝酸鹽和硫胺素含量較高。B5培養(yǎng)基經過高壓滅菌后為無菌溶液，因此僅用于科研領域，不用于臨床診斷或治療。

B5培養(yǎng)基是由Gamborg等人在1968年為培養(yǎng)大豆根細胞而設計的。這種培養(yǎng)基的主要特點是含有較低的銨鹽，這可能對一些培養(yǎng)物的生長有抑制作用，但對于其他一些植物來說則是更適宜的生長環(huán)境。除了無機鹽成分，B5培養(yǎng)基還包含維生素B1、B6、煙酸和肌醇等有機物質，這些都是植物生長所必需的營養(yǎng)素。

在制備B5培養(yǎng)基時，首先稱取適量的B5培養(yǎng)基粉末，加入蒸餾水或去離子水中，然后加熱煮沸至完全溶解。接著，根據培養(yǎng)基的用途，可以添加其他營養(yǎng)成分或激素。調節(jié)pH值至預定水平后，分裝到培養(yǎng)容器中，并進行高壓滅菌。

B5培養(yǎng)基

B5培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)技術中扮演著重要角色。植物組織培養(yǎng)技術，也稱為離體培養(yǎng)技術，利用植物體的離體器官、組織或細胞，在適宜的條件下誘導出愈傷組織、不定芽、不定根，最終形成完整的植株。B5培養(yǎng)基為這些植物細胞和組織提供了必要的營養(yǎng)和生長環(huán)境。

此外，B5培養(yǎng)基也常用于液體接種操作。液體接種是將菌液從一種培養(yǎng)基轉移到另一種培養(yǎng)基的過程，可以通過從固體培養(yǎng)基洗下菌體，或者從液體培養(yǎng)物中用移液管將菌液接至新的培養(yǎng)基中來實現(xiàn)。

在使用B5培養(yǎng)基時，需要注意避免與皮膚、眼睛接觸，并在使用前進行高壓滅菌以確保無菌。同時，根據不同的植物種類和實驗需求，可能需要調整培養(yǎng)基的配方和條件。

請注意，B5培養(yǎng)基的具體配方和使用方法可能因品牌和用途的不同而有所差異，因此在實際應用中，建議參考產品說明書或咨詢專業(yè)人士的建議。

應用^[4-5]

B5培養(yǎng)基可以用于花櫚木體細胞胚胎發(fā)生誘導及其機理研究

為了建立花櫚木體細胞胚胎發(fā)生體系及探索其發(fā)生機理,本文對影響花櫚木體胚發(fā)生誘導的內外因子進行篩選,并對花櫚木不同體胚時期的生理生化特性、組織細胞學變化、組織化學特性和分子生物學特性展開研究,以期建立花櫚木體胚發(fā)生體系,并從生理生化、組織細胞學和組織化學以及轉錄組學等方面揭示花櫚木體細胞胚胎發(fā)生機理,并初步探索人工種子制作方法。

主要研究結果如下:1.花櫚木體細胞胚胎發(fā)生受外部因子和內部因子共同影響。在外部因子中,成熟胚在B5培養(yǎng)基中添加BA(0.2 mg/L)和2,4-D(2.75 mg/L)或BA(1.0 mg/L)和NAA(0.5 mg/L)效果最好,胚性愈傷組織誘導率均超過30%。胚性愈傷組織的增殖誘導率在B5培養(yǎng)基中添加KT(0.5 mg/L)和2,4-D(1.0 mg/L)的誘導率較高,質地較好。培養(yǎng)方式以懸浮培養(yǎng)胚性愈傷組織增殖率和體胚發(fā)生頻率高。培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和0.5 g/L谷氨酰胺能夠促進胚性愈傷組織和體細胞胚胎的誘導。在內部因子中,基因型GZGL的胚性愈傷誘導率最高(41.07%),基因型GZPT體胚誘導率最高(18.4%);在不同外植體中,成熟胚是花櫚木體細胞胚胎發(fā)生適宜的外植體;而未成熟胚的體胚誘導率以9月初采集的材料最好。

2.體細胞胚的萌發(fā)率在B5培養(yǎng)基中添加BA(0.5 mg/L)和NAA(0.2 mg/L),其萌發(fā)率最高為54.81%;子葉胚數(shù)量在B5培養(yǎng)基中添加TDZ(0.5 mg/L)和NAA(0.2 mg/L)較多;而子葉胚的生根誘導率在B5培養(yǎng)基中添加0.5 mg/L IBA和0.5 mg/L NAA,其生根率最高為92.5%;健壯的幼苗在瓶內馴化一周后,移栽至基質(珍珠巖:蛭石:泥炭土=1:1:1)中成活率可達97.2%。人工種子膠囊的物理性質受制作方法和附加物的影響。在人工種子制作方法中,雙層包埋法的人工種子膠囊物理性質優(yōu)于單層包埋法,且其外觀形狀較空心珠法更加完整。雙層包埋法人工種子膠囊添加20g/L保水劑,其物理性質最好。花櫚木人工種子膠囊添加B5培養(yǎng)基、1.0 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA、1.0 mg/L GA3、30 g/L蔗糖,其萌發(fā)率為96%,但人工種子萌發(fā)率在4℃下隨貯藏時間的增加呈逐漸下降趨勢。

參考文獻

[1]Dynamic Transcriptome Analysis Reveals Uncharacterized Complex Regulatory Pathway Underlying Genotype-Recalcitrant Somatic Embryogenesis Transdifferentiation in Cotton[J].Huihui Guo;;Haixia Guo;;Li Zhang;;Yijie Fan;;Jianfei Wu;;Zhengmin Tang;;Yao Zhang;;Yupeng Fan;;Fanchang Zeng.Genes,2020

[2]Global scale transcriptome analysis reveals differentially expressed genes involve in early somatic embryogenesis in Dimocarpus longan Lour.[J].Chen Yukun;;Xu Xiaoping;;Liu Zhuanxia;;Zhang Zihao;;XuHan Xu;;Lin Yuling;;Lai Zhongxion.BMC genomics,2020

[3]Transcriptome analysis of the induction of somatic embryogenesis in Coffea canephora and the participation of ARF and Aux/IAA genes.[J].Quintana-Escobar Ana O;;Nic-Can Geovanny I;;Galaz Avalos Rosa María;;Loyola-Vargas Víctor M;;Gongora-Castillo Elsa.PeerJ,2019

[4]Comparative transcriptome analysis highlights the hormone effects on somatic embryogenesis in Catalpa bungei.[J].Liu Wen;;Wang Changlan;;Shen Xiangling;;Liang Hongwei;;Wang Yubing;;He Zhengquan;;Zhang Dechun;;Chen Faju.Plant reproduction,2019

[5]吳高殷.花櫚木體細胞胚胎發(fā)生誘導及其機理研究[D].貴州大學,2022.