背景^[1-6]

染色體核型分析服務(wù)是指將待測細(xì)胞的染色體依照該生物固有的染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，按照一定的規(guī)定，人為的對其進(jìn)行配對、編號和分組，并進(jìn)行形態(tài)分析的過程。不同物種的染色體都有各自特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)（包括染色體的數(shù)目、長度、著絲點位置、臂比、隨體大小等）特征，而且這種形態(tài)特征是相對穩(wěn)定的。經(jīng)染色或熒光標(biāo)記的染色體，通過一定的光學(xué)或電化學(xué)顯色設(shè)備就可以清晰而直觀的觀察到染色體的具體形態(tài)結(jié)構(gòu)，再與正常核型進(jìn)行對比尋找差異，進(jìn)而確定染色體的缺失、重復(fù)和倒置等現(xiàn)象。

染色體核型分析服務(wù)作為細(xì)胞遺傳學(xué)研究的基本方法，染色體核型分析是研究物種演化、分類以及染色體結(jié)構(gòu)、形態(tài)與功能之間關(guān)系所不可缺少的重要手段，特別是在產(chǎn)前遺傳病的診斷，研究基因定位等方面，有著重要的應(yīng)用價值。

正常人的體細(xì)胞染色體數(shù)目為46條，并有一定的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。正常男性的染色體核型為44條常染色體加2條性染色體X和Y，檢查報告中常用46，XY來表示。正常女性的常染色體與男性相同，性染色體為2條XX，常用46，XX表示。46表示染色體的總數(shù)目，大于或小于46都屬于染色體的數(shù)目異常。缺失的性染色體常用O來表示。染色體在形態(tài)結(jié)構(gòu)或數(shù)量上的異常被稱為染色體異常，由染色體異常引起的疾病為染色體病?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的染色體病有100余種，染色體病在臨床上?？稍斐闪鳟a(chǎn)、先天愚型、先天性多發(fā)性畸形、以及癌癥等。

臨床上染色體檢查的目的就是為了發(fā)現(xiàn)染色體異常和診斷由染色體異常引起的疾病。染色體組型分析是細(xì)胞遺傳學(xué)研究的基本方法，是研究物種演化、分類以及染色體結(jié)構(gòu)、形態(tài)與功能之間關(guān)系所不可缺少的重要手段。通過染色體核型分析，可以根據(jù)染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異情況來判斷生物是否患有某種因染色體片段缺失、重復(fù)或倒置等引起的遺傳病。如產(chǎn)前21三體綜合征的診斷，通過核型分析可以在遺傳基礎(chǔ)上確定該疾病。此外，聯(lián)合熒光原位雜交技術(shù)，還可以對基因進(jìn)行定位。

染色體核型分析方法包括:

1.常規(guī)的形態(tài)分析。選用分裂旺盛細(xì)胞的有絲分裂中期的染色體制成染色體組型圖，以測定各染色體的長度（微米）或相對長度（％），著絲粒位置及染色體兩臂長的比例（臂比），鑒別隨體及副縊痕的有無作為分析的依據(jù)。

2.帶型分析。G顯帶技術(shù)是通過Giemsa染色方法使染色體的不同區(qū)域著色，使染色體在光鏡下呈現(xiàn)出明暗相間的帶紋。每個染色體都有特定的帶紋，甚至每個染色體的長臂和短臂都有特異性。根據(jù)染色體的不同帶型，可以更細(xì)致而可靠地識別染色體的個性。

3.著色區(qū)段分析。染色體經(jīng)低溫、KCl和酶解，HCl或HCl與醋酸混合液體等處理后制片，能使染色體出現(xiàn)異固縮反應(yīng)，使異染色質(zhì)區(qū)段著色可見。在同源染色體之間著色區(qū)段基本相同，而在非同源染色體之間則有差別。

應(yīng)用^[7][8]

染色體核型分析服務(wù)可用于產(chǎn)前21三體綜合征的診斷：

羊水細(xì)胞染色體核型分析和微列陣比較基因組雜交技術(shù)驗證無創(chuàng)產(chǎn)前檢測的研究中用外周血細(xì)胞在生長刺激因子-植物凝集素（PHA）作用下經(jīng)37℃，72小時培養(yǎng)，獲得大量分裂細(xì)胞，然后加入秋水仙素使進(jìn)行分裂的細(xì)胞停止于分裂中期，以便染色體的觀察；再經(jīng)低滲膨脹細(xì)胞，減少染色體間的相互纏繞和重疊，最后用甲醇和冰醋酸將細(xì)胞固定于載玻片上，在顯微鏡下觀察染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)量。

對NIPT提示信號異常的95例孕婦行羊膜腔穿刺術(shù),抽取羊水進(jìn)行培養(yǎng)后行染色體核型分析驗證其符合率;同時對提示除外21-三體、18-三體、13-三體的常染色體異常(即其他常染色體異常)的患者行array-CGH分析,驗證其符合率。NIPT的結(jié)果需要驗證,經(jīng)典的羊水細(xì)胞染色體核型分析技術(shù)可以驗證胎兒染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常,array-CGH可以驗證微缺失或者微重復(fù),分辨率更高。

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