基本信息

中性紅，英文名稱：Basic Red 5，CAS號(hào)：553-24-2，分子式：C15H17ClN4，分子量：288.78，EINECS號(hào)：209-035-8，熔點(diǎn)：290°C(dec.)(lit.)，沸點(diǎn)：441.31°C(rough estimate)，密度：1.1590(rough estimate)，折射率：1.6110(estimate)，儲(chǔ)存條件：Store at +5°C to +30°C，溶解度：H2O：可溶，10mg/mL，色指數(shù)：50040，酸度系數(shù)(pKa)：6.7，7.4(at 25℃)，酸堿指示劑變色ph值范圍：6.8(red)-8(yellow)，PH值：3.1(10g/L，H2O，20℃)，氣味(Odor)：無味，水溶解性：50g/L，最大波長(zhǎng)(λmax)：540nm，533nm，544nm，529nm，454nm，穩(wěn)定性：穩(wěn)定的，與強(qiáng)氧化劑不相容，是深綠色固體。它是水、亞硝酸鹽和尿的堿度指示劑；在組織化學(xué)中它用于脂肪的水解指示劑。同時(shí)它也是一種較好的生物染色劑；用于神經(jīng)細(xì)胞的尼爾(Nissl)小粒染色與健那綠共用于血液體外活體染色。中性紅用途廣泛，適用于碘離子的光度測(cè)定以及中性紅試紙制備。

制備方法

(一)亞硝化反應(yīng)：向裝配有攪拌器、溫度計(jì)的2000ml的燒杯中加入200克N,N-二甲基苯胺，攪拌下，慢慢加入600克工業(yè)濃鹽酸(濃度為37～38wt％)，待冷至室溫后，加入細(xì)碎冰塊，使溫度降至5℃以下，再在攪拌下慢慢滴加133克亞硝酸鈉溶液于250克水溶液，與此同時(shí)隨時(shí)添加細(xì)碎冰，使反應(yīng)溫度維持在8℃以下，約1小時(shí)加完。加完后繼續(xù)攪拌2小時(shí)，有橙黃色沉淀析出。將橙黃色沉淀物用瓷孔漏斗真空抽濾，濾取N，N-二甲基-4-亞硝基苯胺鹽酸鹽，約得335克(濕品)。

(二)縮合、氧化閉合反應(yīng)：把裝配有攪拌器、溫度計(jì)、冷凝器以及加料口的5000ml四口圓底燒瓶座置于套式恒溫器中，并在瓶中加入3600克蒸餾水、115克2，4-二氨基甲苯，攪拌加熱至90℃，使2，4-二氨基甲苯完全溶解于水中，然后加入3.5克氯化亞鐵，繼續(xù)加熱，在90℃時(shí)漫漫加入175克N，N-二甲基-4-亞硝基苯胺鹽酸鹽(以干品計(jì))，反應(yīng)溫度維持在90℃～95℃，約30分鐘加完，并在溫度92℃～98℃間保溫3/4小時(shí)，然后將反應(yīng)液用三層府綢布自然過濾，濾液置于10升的小搪瓷玻璃容器中，隨即加入濾請(qǐng)后的工業(yè)濃鹽酸2200克，攪勻后使其靜置冷卻。三天后結(jié)晶全部析出。濾取結(jié)晶，并離心、甩干，甩干品置于恒溫烘箱中干燥。干燥溫度為105℃～115℃，得150克中性紅產(chǎn)品，得率為理論量的56％，純度≥97％，外觀呈墨綠色結(jié)晶性粉末，pH變色域6.8(紅)～8.0(桔黃)，硫酸灰份≤3％，105℃干燥失重≤3％。

參考文獻(xiàn)

[1]李文友,吳會(huì)靈,何錫文,等.中性紅熒光探針法測(cè)定生物大分子核酸[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào),2003,24(10):1787-1789.DOI:10.3321/j.is sn:0251-0790.2003.10.044.