背景^[1-3]

NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系是一種常用的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系，用于研究淋巴瘤的生物學(xué)特性和治療機(jī)制。這種細(xì)胞系由大鼠的淋巴瘤細(xì)胞建立而來，具有維持淋巴瘤細(xì)胞生長和分化的能力。

NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系在淋巴瘤研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。通過利用這種細(xì)胞系，研究人員可以深入研究淋巴瘤的生物學(xué)特性，了解淋巴瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和耐藥機(jī)制，以及探索淋巴瘤治療的新藥和新方法。例如，研究人員可以使用NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系建立動(dòng)物模型，模擬人類淋巴瘤的發(fā)生和發(fā)展過程，從而更好地理解淋巴瘤的發(fā)病機(jī)制和治療方法。

此外，NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系還可以用于評(píng)估和篩選對(duì)淋巴瘤具有治療作用的藥物或化合物，以及測試和開發(fā)新的淋巴瘤治療方法。這種細(xì)胞系具有生長穩(wěn)定、易于培養(yǎng)和操作簡便等特點(diǎn)，為相關(guān)研究提供了可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

c、按6-8 mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

d、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

應(yīng)用^[4-5]

NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系可以用于槲皮素和17-AAG對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞和人淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞增殖與輻射敏感性的研究

研究探討槲皮素對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞骨髓細(xì)胞和人淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞增殖抑制作用及聯(lián)合γ射線研究輻射敏感性的影響。研究探討17-AAG對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞和骨髓細(xì)胞增殖抑制作用及聯(lián)合γ射線研究輻射敏感性的影響。研究探討槲皮素聯(lián)合17-AAG對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞增殖抑制作用。

方法:采用CCK-8法檢測NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞生長增殖和Annexin V/PI雙染色法檢測細(xì)胞早期凋亡率研究槲皮素對(duì)體外培養(yǎng)人Burkitt’s淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞的增殖、凋亡和輻射敏感性的影響并探討其可能機(jī)制。采用CCK-8法測定NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞活性,研究不同濃度槲皮素和17-AAG對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞和骨髓細(xì)胞增殖作用和輻射敏感性的影響。采用CCK-8法測定細(xì)胞活性,研究槲皮素聯(lián)合17-AAG對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞存活率的影響。結(jié)果:1槲皮素對(duì)Raji細(xì)胞有生長增殖抑制作用,且有一定的時(shí)間依賴關(guān)系,對(duì)Raji細(xì)胞有一定的輻射增敏效應(yīng)。

2在短作用時(shí)間和低藥物濃度時(shí),槲皮素對(duì)NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系有一定的保護(hù)作用,對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞輻射敏感性有減弱作用。槲皮素對(duì)大鼠骨髓細(xì)胞有一定的保護(hù)作用,保護(hù)作用與藥物濃度和作用時(shí)間呈明顯正相關(guān),對(duì)大鼠骨髓細(xì)胞輻射敏感性有減弱的作用(P<0.01)。

3 17-AAG對(duì)細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用,且抑制作用與藥物濃度和作用時(shí)間呈明顯正相關(guān),對(duì)NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系輻射敏感性沒有影響。17-AAG對(duì)大鼠骨髓細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用,且抑制作用與藥物濃度呈明顯正相關(guān),和作用時(shí)間呈負(fù)相關(guān),對(duì)大鼠骨髓細(xì)胞輻射敏感性有增強(qiáng)的作用(P<0.01)。

4槲皮素聯(lián)合17-AAG對(duì)NB2大鼠淋巴瘤細(xì)胞系的增殖有一定的協(xié)同抑制作用(P<0.01)。

參考文獻(xiàn)

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[3]Hsp70 chaperones:Cellular functions and molecular mechanism[J].M.P.Mayer;;B.Bukau.Cellular and Molecular Life Sciences,2005(6)

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