簡(jiǎn)介
隨著工業(yè)技術(shù)和科學(xué)研究的發(fā)展,制備FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸從最初的化學(xué)合成法到現(xiàn)在的生物催化法,實(shí)現(xiàn)了從高成本到低成本,高污染到低污染,高能耗到低能耗。其作為很多藥物合成的中間體,在生物領(lǐng)域、化工領(lǐng)域、醫(yī)藥領(lǐng)域等都具有十分重要的作用,因此對(duì)FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線的研究將一直作為熱門項(xiàng)目,吸引一批又一批的科學(xué)家及研究人員不斷探索、不斷創(chuàng)新[1]。
合成
圖1 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線
將3 N HCl/MeOH(1:1,10 mL)溶液加熱至70°C。在5分鐘內(nèi)滴加溶解在MeOH(5 mL)中的反應(yīng)物(2.36 g,4.16 mmol)。攪拌反應(yīng)混合物40分鐘。將反應(yīng)物冷卻至室溫,真空濃縮,再懸浮于10%碳酸鈉水溶液(25mL)中。加入EDTA二鈉鹽(3.09克,8.31毫摩爾)并在室溫下攪拌0.5小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至0°C,并加入溶解在丙酮(25 mL)中的Fmoc-OSu(1.54 g,4.57 mmol)溶液。將反應(yīng)緩慢加熱至室溫并攪拌22小時(shí)。用EtOAc(50mL)稀釋反應(yīng)物,并用1N HCl(3×50mL)洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)層,過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)快速色譜法(硅膠,1-5%MeOH在CH2Cl2中的梯度)純化產(chǎn)物以獲得產(chǎn)物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸。合成路線如圖1所示[2]。
圖2 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線
將濃鹽酸(10當(dāng)量)加入烷基化的(S),(R)-Ala-Ni(II)-(S)-2-[N-(N’-芐基丙酰基)氨基]二苯甲酮在MeOH(40mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在80°C下回流1小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。向反應(yīng)混合物中加入20mL水(20mL)。用DCM(3×20mL)提取水層。用鹽水沖洗合并的有機(jī)層。用MgSO4干燥有機(jī)層。在減壓下濃縮有機(jī)層。通過(guò)從丙酮溶液中以鹽酸鹽形式沉淀來(lái)純化產(chǎn)物。通過(guò)冷凍干燥干燥水層得到標(biāo)題化合物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸。合成路線如圖2所示。
圖3 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線
將鎳絡(luò)合物(3.20 g,6.25 mmol)和叔丁醇鉀(1.05 g,9.37 mmol)添加到RBF中,并在0°C和Ar氣氛下溶解在干燥的DMF(25 mL)中。將溶液攪拌3分鐘,然后加入1-碘-2-甲基丙烷(2.16 mL,18.7 mmol)。在0°C下攪拌反應(yīng)30分鐘,然后再加熱至室溫75分鐘。加入5%乙酸水溶液(100 mL)使反應(yīng)驟冷,然后用CH2Cl2(3×75 mL)萃取。用鹽水(2×75mL)洗滌合并的有機(jī)層。用Na2SO4干燥,過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)快速色譜法純化非對(duì)映異構(gòu)體FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸(硅膠;EtOAc中的2.5%MeOH)。合成路線如圖3所示。
參考文獻(xiàn)
[1] 王浚哲,閆倩玉,徐皓然等. 大腸桿菌合成FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的代謝工程研究 [J]. 中國(guó)釀造, 2023, 42 (04): 46-52.
[2] Cromm, Philipp M.; et al. Protease-Resistant and Cell-Permeable Double-Stapled Peptides Targeting the Rab8a GTPase. ACS Chemical Biology (2016), 11(8), 2375-2382