背景[1-7]
高效免疫組化二抗試劑盒基于聚合物技術(shù)的最新一代免疫組化二抗非生物素檢測系統(tǒng)，與傳統(tǒng)的免疫組化二抗試劑盒相比，具有以下特點(diǎn)：
1.信號(hào)更強(qiáng)、操作更加簡單，可有效減少一抗使用量，一抗試劑可再稀釋2-4倍，節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本；
2.避免生物素的使用，從而避免由生物素引起的非特異性背景顯色，顯色更清晰，背景更干凈；
3.快速更短的試劑孵育時(shí)間，節(jié)省時(shí)間成本；
免疫組化（IHC）是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合原理和特殊的標(biāo)記技術(shù)，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體顯色，對組織細(xì)胞內(nèi)的特異性抗原進(jìn)行定位、定性、定量檢測的一門技術(shù)。本文主要總結(jié)二抗原理及其特點(diǎn)，以提供更好的選擇。
檢測方法原理：
1.SABC法
原理：SABC法是利用鏈酶親和素(Streptavidin)與生物素(Biotin)特有的高度親和力這一生物學(xué)性質(zhì)，先將生物素與辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合，形成生物素化HRP，然后與鏈酶親和素按一定比例混合，形成SABC復(fù)合物。用生物素化二抗與抗體結(jié)合，再與SABC復(fù)合物聯(lián)結(jié)形成抗原～抗體～生物素化二抗～SABC復(fù)合物。最后用底物顯色劑顯色。
特點(diǎn)：該法具有靈敏度高以及低背景染色等特點(diǎn)。
2.SP法
原理：根據(jù)生物素(Biotin)與鏈霉親和素(Streptavidin)具有強(qiáng)結(jié)合力的原理設(shè)計(jì)。在一抗（兔源與鼠源）與相應(yīng)的靶抗原結(jié)合后，生物素化標(biāo)記的抗多價(jià)二抗與一抗特異結(jié)合；二抗上標(biāo)記的生物素與標(biāo)記了辣根過氧化物酶（HRP）的鏈霉親和素結(jié)合，形成抗原～特異性一抗～生物素化的二抗～HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物。
特點(diǎn)：該法孵育時(shí)間短（通常為10min），靈敏度高以及低背景染色等特點(diǎn)。
3.Polymer酶標(biāo)二抗法
原理：該法采用一段多聚氨基酸聚合物做為載體鏈，將該多聚物與二抗結(jié)合，然后可再標(biāo)記上多個(gè)HRP/AP酶分子，所以同樣具有很高的信號(hào)放大作用。
特點(diǎn)：靈敏度高；操作步驟簡單；無需進(jìn)行內(nèi)源性的生物素封閉。
4.直接酶標(biāo)二抗法
該法是將HRP/AP酶分子直接標(biāo)記于二抗上。因此需要普通的酶標(biāo)二抗即可完成。實(shí)驗(yàn)簡單，成本低，但是因?yàn)闆]有信號(hào)放大作用，所以對很多表達(dá)豐度不是很高的抗原就可能檢測不到。
應(yīng)用[8]
高效免疫組化二抗試劑盒可用于檢測疾病的標(biāo)記物檢測以及疾病診斷：
例如在診斷曲霉菌性鼻竇炎的實(shí)驗(yàn)中用免疫組化方法在診斷曲霉菌性鼻竇炎。方法:采用Envision免疫組織化學(xué)二步法對懷疑曲霉菌性鼻竇炎的標(biāo)本和對照標(biāo)本染色,并與真菌學(xué)檢查和HE、PAS染色進(jìn)行對比。結(jié)果:40例中真菌培養(yǎng)19例為曲霉,4例污染菌,常規(guī)HE和PAS染色均可見菌絲或孢子,但不能確定種屬,免疫組化染色耗時(shí)5~24h,示40例陽性,染色背景清晰,對比度強(qiáng)。4例對照標(biāo)本免疫組化染色陰性。結(jié)論:此方法可敏感、特異地檢出組織中的曲霉菌,為利用免疫組化方法診斷曲霉菌性鼻竇炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),有助于臨床診斷和研究。
參考文獻(xiàn)
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