免疫磁珠技術[1]
免疫磁珠由載體微球和免疫配基結(jié)合而成,載體微球的核心是金屬小顆粒,核心外包裹著一層高分子材料,最外層是功能層,如氨基、羧基、羥基。磁珠具有超順磁性。超順磁性由粒子的量子效應產(chǎn)生,使磁珠不會被磁化。由于磁珠足夠小,因而可以懸浮在液體中保持相當長的時間不聚沉。直徑大于 1 μm 的磁珠可以用普通磁鐵分離,而直徑小于 1 μm 的需要高強度磁場的磁性分離器分離。
無機磁珠需要在其表面進行高分子有機合成、生物合成或多孔玻璃反應包覆配體才能用作生物分離用。修飾磁珠表面的配體可以對目的蛋白質(zhì)進行親和吸附以達到分離的結(jié)果。鏈親和素,抗體,A 蛋白,G 蛋白等是經(jīng)常用作蛋白分離的配體。磁珠表面的配體可暴露產(chǎn)生的-COOH,-OH,-NH2 等功能基團與蛋白質(zhì)上的相應基團反應而使蛋白耦聯(lián)即可發(fā)生固定化反應。在實驗室中還可以將磁珠表面硅烷化,再將配體與其偶聯(lián)后固定化酶,這樣可使酶的活性不至于暴露于無機鐵氧體而降低。近年來非球形的磁性材料諸如磁性納米管也已被鑒定出可以用于特定蛋白的吸附分離。
GST融合蛋白
融合標簽技術廣泛用于基因工程研究,蛋白質(zhì)的表達經(jīng)常用到各種融合表達系統(tǒng)。谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST),基因融合表達體系具有較高的蛋白表達效率,表達產(chǎn)物純化方便且利于相關抗體的制備,是目前應用最為廣泛的親和標簽之一。
Mag-Beads GST融合蛋白純化磁珠研究進展[2]
目前國外已有公司研制出了用于純化融合蛋白的磁性微粒并得到了實際應用,但價格都比較高,國內(nèi)尚不能制備高質(zhì)量的。世紀年代以來國內(nèi)科研人員不斷探索和嘗試,在其研究領域內(nèi)制備各自所需。朱頗安等,應用材料學和免疫學的新技術在國內(nèi)首次研制成功,與國外同類產(chǎn)品進行相關試驗比較后認為自制符合質(zhì)量控制要求,也因此自制獲得了國家專利,并被評為年度武漢市十大科技成果之一。王海青等制備出用于癌癥標志物早期診斷的,并對其進行了評價。張蓉蓉,李樹清等分別以分離豬胸膜肺炎放線桿菌,發(fā)現(xiàn)可以顯著提高此病原菌的分離效率。李鶴等采用化學沉淀法與球磨法制備磁性微球,并采用反相懸浮包埋法制備一,為從豬血清中分離純化開辟了一條新的途徑。
參考文獻
[1] Sang Jun Son, Jonathan Reichel, Bo He, et al. Magnetic nanotubes for
magnetic-field-assisted bioseparation,biointeraction and drug delivery[J].
[2] GST抗體包被免疫磁珠納米佐劑的初步研究