背景[1-3]
2型補(bǔ)體受體抗體是一類可以特異性結(jié)合2型補(bǔ)體受體的多克隆抗體蛋白，主要用于需要檢測(cè)2型補(bǔ)體受體的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì)，存在于人和脊椎動(dòng)物血清及組織液中，不耐熱，活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)?？杀豢乖?抗體復(fù)合物或微生物所激活，導(dǎo)致病原微生物裂解或被吞噬?？赏ㄟ^三條既獨(dú)立又交叉的途徑被激活，即經(jīng)典途徑、旁路途徑和凝集素途徑。
2型補(bǔ)體受體即CD21，補(bǔ)體片段C3d、C3dg的受體。主要表達(dá)于人成熟B細(xì)胞和濾泡樹突狀細(xì)胞表面，可調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化、增殖和IgE產(chǎn)生，也是EB病毒受體，與鼻咽癌發(fā)生相關(guān)。
2型補(bǔ)體受體抗體
補(bǔ)體受體complement receptor存在于不同細(xì)胞膜表面，能與補(bǔ)體激活過程所形成的活性片段相結(jié)合，介導(dǎo)多種生物效應(yīng)的受體分子。
對(duì)補(bǔ)體第三成分（C3）的受體，存在于多形核白血球、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、人O型血的紅細(xì)胞、哺乳動(dòng)物的血小板中．在補(bǔ)體活化途徑的途徑，在抗原抗體復(fù)合體上是按C1→C4→C2→C3的順序進(jìn)行反應(yīng)；第二途徑是在血清中各種因子的存在下，譬如對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁等成分C3進(jìn)行反應(yīng)。進(jìn)行反應(yīng)的C3活化后，分為C3a和C3b，而C3b可附著于抗原和細(xì)菌多形核白細(xì)胞（特別是嗜中性細(xì)胞）和巨噬細(xì)胞，通過C3b受體對(duì)物質(zhì)進(jìn)行捕捉，經(jīng)吞噬作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。B細(xì)胞的補(bǔ)體受體，雖然有與T細(xì)胞區(qū)別的標(biāo)記，但其作用并不清楚；而紅細(xì)胞和血小板的受體的作用也不清楚，但利用它所進(jìn)行的免疫粘結(jié)法則是補(bǔ)體的定量法之一。對(duì)C3b分解產(chǎn)物的C3d的受體也認(rèn)為是巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞，但反應(yīng)性較弱．
應(yīng)用[4][5]
用于B淋巴細(xì)胞在功能性治愈的慢性乙型肝炎患者的免疫學(xué)特征研究
通過雙熒光染料偶聯(lián)HBV特異性B細(xì)胞,直接體外檢測(cè)實(shí)現(xiàn)功能性治愈的CHB患者B細(xì)胞亞群及功能受體的特征,探討實(shí)現(xiàn)功能性治愈的適應(yīng)性免疫機(jī)制。
【方法】納入NAs經(jīng)治聯(lián)合Peg-IFNα治療的患者（IFN-α組）,共25人;未治療CHB患者（CHB組）,共7人。根據(jù)治療終點(diǎn)是否發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換,IFN-α治療組分為:治愈組（Cure,CR組）:發(fā)生HBs Ag血清學(xué)轉(zhuǎn)換,伴或不伴HBs Ab產(chǎn)生,HBe Ag（-）;未治愈組（Non-Cure,NCR組）:未發(fā)生HBs Ag血清學(xué)轉(zhuǎn)換或HBe Ag（+）。分離患者外周血PBMC,將重組HBs Ag、HBc Ag分別與D488、D650染料結(jié)合,合成HBV特異性偶聯(lián);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者外周血總B細(xì)胞、HBs Ag/HBc Ag特異性B細(xì)胞中c MBC（CD21+、CD27+）、act MBC（CD21-、CD27+）、at MBC（CD21-、CD27-）,Ig M+、Ig G+在不同分組間細(xì)胞頻數(shù)的差異,同時(shí)檢測(cè)活化受體CD38、CD69以及抑制性受體Fc RL5、PD-1在HBs Ag特異性B細(xì)胞的表達(dá),使用t檢驗(yàn)或方差分析比較組間差異。使用pearson線性回歸分析相關(guān)性。
【結(jié)果】（1）總B細(xì)胞及記憶B細(xì)胞中各亞組及膜免疫球蛋白表達(dá)的比較IFNα治療組的患者外周血總B細(xì)胞中c MBC與CHB組、HC組相比下降（p=0.12,p=0.02）。IFNα治療組中記憶B細(xì)胞c MBC頻數(shù)與HC組相比下降（p=0.002）,而act MBC、at MBC頻數(shù)較CHB組及HC組升高（act MBC p=0.03,p=0.011）（at MBC p=0.019,p=0.048）。經(jīng)過Peg-IFNα序貫聯(lián)合NAs治療后,IFNα組患者總B細(xì)胞中Ig G+細(xì)胞頻數(shù)低于CHB組（p=0.02）。IFNα組患者記憶B細(xì)胞中Ig M+細(xì)胞頻數(shù)低于CHB組、HC組（p=0.12,p=0.12）。
（2）HBV特異性B細(xì)胞不同亞組及膜免疫球蛋白比較分析IFNα組中,CR組HBs Ag特異性B細(xì)胞中c MBC頻數(shù)相比NCR組升高（p=0.12）,IFNα組HBs Ag特異性B細(xì)胞中c MBC頻數(shù)與血清HBs Ab水平呈正相關(guān)關(guān)系（R~2=0.1890,F=0.0299,p=0.03）。IFNα組HBc Ag特異性B細(xì)胞中c MBC、at MBC、Ig G+細(xì)胞頻數(shù)顯著低于CHB組（p=0.0002,p=0.04,p=0.0009）;Ig M+細(xì)胞頻數(shù)顯著高于CHB組（p=0.0009）。所有患者HBc Ag特異性B細(xì)胞頻數(shù)顯著高于HBs Ag特異性B細(xì)胞（p＜0.001）。
（3）總B細(xì)胞及HBs Ag特異性B細(xì)胞功能受體及抑制受體表達(dá)比較IFNα組總B細(xì)胞、HBs Ag特異性B細(xì)胞中CD38細(xì)胞頻數(shù)相比CHB組顯著升高（p=0.004,p=0.002）;IFNα治療組HBs Ag特異性B細(xì)胞中,CD69 MFI相比CHB組顯著升高（p=0.004）;IFNα組中,CR組HBs Ag特異性B細(xì)胞中CD69細(xì)胞頻數(shù)較NCR組顯著升高（p=0.04）。抑制受體FcRL5、PD-1在不同組間無差異,集中表達(dá)于at MBC。
【結(jié)論】NAs聯(lián)合Peg-IFNα治療使患者外周血總B細(xì)胞及記憶B細(xì)胞亞群發(fā)生改變,發(fā)生抗體亞型轉(zhuǎn)換的記憶B細(xì)胞增多。HBs Ag特異性B細(xì)胞表面活化受體表達(dá)增強(qiáng);這在臨床治愈組更顯著。HBs Ag特異性B細(xì)胞中c MBC頻數(shù)與血清HBs Ab水平相關(guān),提示這一亞群在功能治愈中具有重要作用。
參考文獻(xiàn)
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