背景[1-3]
牛血清白蛋白(無脂肪酸)其內的脂肪酸含量非常低（0.02%），幾乎可忽略，且易溶解。通常用作微量元素，脂肪酸，激素和生長因子的載體蛋白，加入無血清培養(yǎng)體系。牛血清白蛋白(無脂肪酸)允許BSA內加入某些特定的脂肪酸以促進細胞生長。適用于避免脂類或脂肪酸干擾結果的激素或膽固醇分析檢測。產品中總脂肪酸含量≤0.02%。
牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是Edwin J.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術得到5種組份，其中第五種就是白蛋白），CAS號為9048-46-8，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點為4.7。
牛血清白蛋白(無脂肪酸)
牛血清白蛋白，英文名稱為Bovine Serum Albumin，也稱Bovine albumin，或Cohn Fraction V，簡稱BSA。BSA有著極其廣泛的實驗室應用，在免疫實驗中常用作封閉劑，包括ELISA、WB（Western Blot）。作為載體蛋白，將其交聯于半抗原和其他弱抗原可以使它們在抗體生產中具有更強的免疫原性。在限制性內切酶消化反應中，BSA常常被用作一些酶的反應穩(wěn)定劑，并且能防止它粘附到管壁和槍頭上。BSA也常用于生物制藥的生產過程或者作為營養(yǎng)物用于細胞和微生物培養(yǎng)。除此之外，還作為蛋白定量檢測的標準品使用。我們提供的BSA產品，使用優(yōu)質牛血漿，利用熱休克法（Heat Shock）法制備而成。
應用[4][5]
用于擁擠環(huán)境中脂肪酸鹽與血清蛋白相互作用研究
脂肪酸作為機體主要的供能物質,根據其碳鏈長度的不同分為短鏈、中鏈和長鏈脂肪酸。血清蛋白是脂肪酸在體內的主要運輸者,不同鏈長及種類的脂肪酸與血清蛋白的結合機制不同,從而對機體生理生化反應的影響也存在差異。因此,系統地研究脂肪酸與血清蛋白的結合機制對了解脂肪酸在體內的轉運具有重要的生理意義。然而,過去關于脂肪酸與血清蛋白相關研究是在稀溶液中進行的,大分子擁擠環(huán)境中脂肪酸與血清蛋白相互作用卻鮮有報道。
采用不同濃度及分子量的聚乙二醇（PEG）、葡聚糖20（Dextran20）模擬生物體內的大分子擁擠環(huán)境,利用等溫滴定量熱技術（ITC）、穩(wěn)態(tài)熒光光譜（FL）研究不同鏈長的脂肪酸鹽（Na-FA）在擁擠環(huán)境中與牛血清白蛋白（BSA）之間的相互作用,同時采用差示掃描熱量（DSC）和圓二色譜（CD）方法研究擁擠環(huán)境中Na-FA對BSA二級結構以及熱力學穩(wěn)定性的影響。
研究的內容包括:（1）PEG2000擁擠環(huán)境中,不同鏈長脂肪酸鹽與血清蛋白相互作用的研究研究發(fā)現,與稀溶液中相比,在PEG2000擁擠環(huán)境中,短鏈Na-FA與BSA的結合方式由一位點結合逐漸過渡到兩位點結合,且辛酸鈉（C8）、壬酸鈉（C9）和癸酸鈉（C10）與BSA的結合常數（K）均大于稀溶液中。而月桂酸鈉（C12）,油酸鈉（C18:1）和亞油酸鈉（C18:2）與BSA的K則均小于稀溶液。從熱力學參數可以得出,飽和Na-FA與BSA結合過程中存在負協同效應,主要以靜電相互作用為主;不飽和Na-FA與BSA結合過程中存在正協同性,以靜電力和范德華力為主。在PEG2000中,BSA的相變溫度（Tm）下降,但是加入Na-FA均使BSA的Tm升高,其中C8、C9和C10使BSA的升高值大于純BSA,存在正的協同性。C12、C18:1和C18:2使BSA相變溫度（Tm）的升高值小于純BSA,即在所有濃度的擁擠環(huán)境中都無法抵消擁擠環(huán)境對BSA相變溫度的影響。
（2）其他大分子擁擠環(huán)境中脂肪酸鹽與血清蛋白相互作用研究研究表明,短鏈Na-FA在PEG200和PEG20000中的結合方式與在Dextran20中結合方式不同。相同濃度PEG擁擠環(huán)境中,C8和C9與BSA的K及焓變值（△H）大于Dextran20中,而C10、C12在PEG和Dextran20中的結合方式均呈現出不對稱的"U"型曲線。此外,擁擠環(huán)境幾乎不影響C18:1和C18:2與BSA的結合類型和結合方式,僅僅影響結合過程中的△H。對BSA的熱力學穩(wěn)定性及結構研究表明,擁擠環(huán)境均使BSA結構螺旋含量下降,Na-FA的加入使其螺旋含量升高,結構更加緊湊。隨著碳鏈長度的增大,BSA的Tm升高,這說明Na-FA使BSA的結構更加穩(wěn)定,兩者之間存在協同效應。
參考文獻
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[5]朱甜甜.擁擠環(huán)境中脂肪酸鹽與血清蛋白相互作用研究[D].浙江工商大學,2017.