背景及概述^[1][2]

非甾體抗炎藥（non-steroidal anti-inflammatorydrugs，NSAIDs）廣泛用于解熱、鎮(zhèn)痛和關(guān)節(jié)炎的治療，但其對(duì)長(zhǎng)期服藥患者的胃腸道、心血管系統(tǒng)和腎臟的不良反應(yīng)。盡管NSAIDs 有這些不良反應(yīng)，在我國治療關(guān)節(jié)炎的3 大類藥物中，NSAIDs 一直是治療各種關(guān)節(jié)炎、多種發(fā)熱和疼痛的主要藥物。利克飛龍是首個(gè)環(huán)氧合酶/脂氧合酶(COX/LOX) 雙靶點(diǎn)抑制劑，作為新一代的非甾體抗炎藥，主要用于骨關(guān)節(jié)炎治療。

最近文獻(xiàn)報(bào)道提示，利克飛龍能顯著的降低損傷血管內(nèi)巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)和單核細(xì)胞趨化因子的表達(dá)，它的抗炎效果優(yōu)于COX抑制劑羅非考昔。國外Ⅲ期臨床研究表明：利克飛龍用于治療骨關(guān)節(jié)炎與萘普生療效相似，且能改善胃腸道安全性，耐受性優(yōu)于萘普生，目前尚在進(jìn)行臨床研究中，國內(nèi)目前對(duì)該藥也正處在研制階段。

結(jié)構(gòu)

藥理作用^[3]

利克飛龍(licofelone)是一種環(huán)氧合酶(COX)、5-脂氧合酶(5-LOX)的雙重抑制 劑，是具有雙重抗炎作用的非甾體抗炎藥，與COX和LOX的活性位點(diǎn)都能結(jié)合，產(chǎn)生高效的抗 炎作用，而且能夠緩解、改善和克服NSAIDs對(duì)胃腸道、心血管系統(tǒng)和腎臟等毒性。

應(yīng)用 ^[1-2]

治療關(guān)節(jié)炎：通過ig 給藥，觀察利克飛龍對(duì)大小鼠的抗炎活性以及炎性因子水平。研究結(jié)果顯示，利克飛龍對(duì)二甲苯引起的耳腫脹有抑制作用，與對(duì)照組對(duì)比差異具有顯著性（P＜0.05或P＜0.01），同等劑量與甲潑尼龍作用相當(dāng)。利克飛龍對(duì)角叉菜膠引起大鼠足趾腫脹4 h 內(nèi)的抑制作用明顯，與甲潑尼龍作用相當(dāng)。小鼠給予利克飛龍后，心率、呼吸和自主行為活動(dòng)均未見異常，小鼠一周體質(zhì)量增長(zhǎng)正常。利克飛龍和塞來昔布均可使PGE2 濃度明顯降低，與塞來昔布作用相當(dāng)。

利克飛龍是德國默克公司研制新型環(huán)氧化酶/5脂氧化酶（COX/5-LOX）抑制劑，理論上既克服了非COX 選擇性NSAIDs 藥物胃腸道不良反應(yīng)發(fā)生的可能性，同時(shí)又降低了COX2 選擇性NSAIDs 藥物心血管不良反應(yīng)發(fā)生的可能性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明利克飛龍抗炎作用與甲潑尼龍和塞來昔布相當(dāng)，能產(chǎn)生高效抗炎作用，由于其抗炎作用明確且理論上安全性高，使患者能夠長(zhǎng)期服用，有望成為臨床上用于解熱、鎮(zhèn)痛和治療關(guān)節(jié)炎疾病首選藥物之一。

用于心肌缺血/再灌注損傷。心肌缺血/再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，與自由基生成過多、鈣超載、白細(xì)胞浸潤(rùn)及內(nèi)皮細(xì)胞自穩(wěn)定失衡有關(guān)[5-6]。CK 主要分布于心肌細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)心肌細(xì)胞缺血損傷時(shí)，Ca2+內(nèi)流，細(xì)胞膜孔增大，引起CK從細(xì)胞內(nèi)外溢，釋放人血。因此，CK 外漏程度可間接反映心肌細(xì)胞的受損程度。本文顯示利克飛龍?zhí)幚盹@著降低缺血再灌注后血清CK 含量，提示利克飛龍能夠降低心肌的缺血再灌注損傷。

NO是一種重要的心血管調(diào)節(jié)因子，對(duì)于冠心病、各臟器缺血再灌注損傷的發(fā)生、發(fā)展有著重要的意義。NOS 是NO 合成過程中的限速酶，NOS的含量對(duì)調(diào)節(jié)NO 的含量起到關(guān)鍵作用，NOS 分幾種不同的亞型：(1)神經(jīng)原型NOS (nNOS)；(2)內(nèi)皮型NOS(eNOS)；(3)誘生型NOS (iNOS)。其中iNOS 主要分布在單核細(xì)胞、肥大細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等細(xì)胞中。

生理情況下iNOS 無活性，當(dāng)受到干擾素（IFN）、白介素-1（IL-1）等炎癥因子刺激時(shí)則可以迅速產(chǎn)生大量NO。有文獻(xiàn)報(bào)道，在心肌缺血/再灌注時(shí)，NO 的含增加，過量的NO 與氧迅速反應(yīng)生成大量的氧自由基如ONOO －、ROONO、HNO2、NO － 2 及N2O3，它們均能產(chǎn)生硝化、亞硝基化和DNA 脫氨基作用，損傷DNA，發(fā)揮細(xì)胞毒作用；同時(shí)過量NO 還可引起心肌細(xì)胞凋亡、壞死和心功能紊亂。

研究顯示利克飛龍能夠抑制血清中總NOS 的活性，對(duì)缺血心肌細(xì)胞起到保護(hù)作用，減輕心肌缺血/再灌注損傷。利克飛龍引起NOS減少的可能機(jī)制是抑制細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)，減少了各類炎癥因子的產(chǎn)生。綜上所述，利克飛龍作為COX/LOX雙靶點(diǎn)抑制劑，可以通過減少心肌缺血/再灌注時(shí)血清中NOS的含量，進(jìn)而減少NO的含量，降低心肌細(xì)胞的損傷，以上結(jié)果提示該藥物可能作為一個(gè)潛在治療心臟疾病的藥物。

檢測(cè)^[4]

1. 色譜條件

色譜柱：Kromasil C1（8 250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.05％磷酸水溶液（60 ∶40，V/V），流速：1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：222 nm；柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：10 μl。

2. 有關(guān)物質(zhì)檢查溶液的配制

1）供試品溶液：避光操作，精密稱取樣品細(xì)粉適量（相當(dāng)于利克飛龍?jiān)纤?0 mg），置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超聲（50 W，40 kHz）處理5 min，取出放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過濾，即得。

2）自身對(duì)照溶液：避光操作，精密量取供試品溶液1 ml，置于100 ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過濾，即得。

3）空白輔料溶液：取空白輔料80 mg，置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超聲處理5 min，取出放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過濾，即得。

3. 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

因本品對(duì)光不穩(wěn)定，因此選擇光降解產(chǎn)物進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。精密稱取樣品細(xì)粉（批號(hào)：20120501，相當(dāng)于利克飛龍?jiān)纤?0 mg）及空白輔料適量，分別置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超聲處理5 min，取出放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，同置于強(qiáng)度4 500 lx 光照箱內(nèi)照射0.5 h 后，搖勻過濾。精密量取10 μl，注入液相色譜儀，結(jié)果顯示，主峰與相鄰雜質(zhì)峰分離度分別為3.6、5.7，分離度良好，理論板數(shù)以利克飛龍峰計(jì)為6 000，空白輔料未見干擾。

4. 專屬性試驗(yàn)

為考察利克飛龍可能的降解產(chǎn)物及色譜條件的選擇是否合理，采用酸、堿、氧化、高溫和光照對(duì)其進(jìn)行破壞處理。取利克飛龍細(xì)粉6 份（批號(hào)：20120501，每份相當(dāng)于原料藥20 mg），分別置于25 ml 量瓶中，加乙酸乙酯2 ml 超聲5 min，取出放冷，分別進(jìn)行以下處理。

5. 線性關(guān)系考察

避光操作，取利克飛龍對(duì)照品適量溶解并稀釋至下列質(zhì)量濃度：8.1、16.2、40.5、81、162 μg/ml，分別精密量取10 μl，照上述色譜條件，注入液相色譜儀，以峰面積（y）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：y＝9 456x－3 758（r＝0.999 9），表明利克飛龍檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍為8.1～162 μg/ml。

6. 精密度試驗(yàn)

精密量取溶液（81 μg/ml）10 μl 連續(xù)進(jìn)樣6 次，結(jié)果RSD為0.21％（n＝6），表明本方法精密度良好。

7. 檢測(cè)限和定量限試驗(yàn)

精密稱取利克飛龍對(duì)照品溶液逐級(jí)稀釋后進(jìn)樣，當(dāng)信噪比為3 ∶1 時(shí)，測(cè)得檢測(cè)限為0.25 ng；當(dāng)信噪比為10 ∶1 時(shí)，測(cè)得定量限為0.89 ng。

8. 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密量取本品制備的供試品溶液10 μl，分別在0、1、2、3、4 h 內(nèi)注入液相色譜儀，記錄利克飛龍峰面積及雜質(zhì)的變化情況。計(jì)算得主峰峰面積RSD 為1.6％（n＝5），雜質(zhì)的含量逐漸增加，0～3 h 的雜質(zhì)分別為0.06％、0.07％、0.08％、0.09％，于第4 h 時(shí)出現(xiàn)了大于0.1％的雜質(zhì)，表明供試品溶液在3 h 內(nèi)穩(wěn)定。

9. 有關(guān)物質(zhì)檢查

采用主成分自身對(duì)照法計(jì)算總雜質(zhì)量。分別精密量取供試品溶液以自身對(duì)照溶液各10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的3 倍。供試品溶液中單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液的主峰面積的0.1％；雜質(zhì)峰面積之和（除溶劑峰外）不得大于對(duì)照溶液主峰面積1.0％。

主要參考資料

[1]利克飛龍對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷的干預(yù)作用研究

[2]利克飛龍的抗炎作用研究

[3] CN201611151330.6 利克飛龍聯(lián)合氟康唑的抗真菌產(chǎn)品及其應(yīng)用

[4] RP-HPLC法檢查利克飛龍片中的有關(guān)物質(zhì)