背景^[1][2]

單克隆抗體技術起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術。經多年研究，鼠單抗已從單純的生物實驗室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識別某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠單抗的親和性不如兔來源抗體的親和性高。然而由于沒有發(fā)現兔源性的漿細胞瘤及病毒體外轉染兔B細胞的技術困難，直到1995年在c-myc/v-abl轉基因兔身上成功地獲得了兔漿細胞瘤細胞系，得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤，才使兔單克隆抗體技術有了突破性進展。

近年兔單克隆抗體技術日臻完善，目前商品化的兔單抗已達數千種。熱休克蛋白（heat shock protein, HSP）是在各種應激因素特別是高溫環(huán)境因素的誘導下產生的一類蛋白質，廣泛存在于人、動物、微生物和植物的細胞中，能提高細胞對抗各種損傷因素的能力，并促進細胞對各種刺激所造成的損傷進行自身修復，具有重要的生物學功能，并與腫瘤細胞的增殖密切相關，HSPs- 肽復合物通過活化體內多個CTL 克隆，可望特異殺傷同一種腫瘤內所有腫瘤細胞，打破免疫耐受，消滅殘存瘤組織，克服目前腫瘤中難以解決的抗原多變性及細胞異質性等困難。

根據其分子量的不同，可分為HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子熱休克蛋白亞家族。其中小分子熱休克蛋白（small heat shock protein, sHSP）幾乎存在于所有生物體中，具有保守的α 晶體蛋白結構域，在細胞內發(fā)揮著不同的功能。

熱休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27）又稱熱休克蛋白B1（heat shock protein B1, HSPB1）是小分子熱休克蛋白家族的重要成員，普遍表達于多種組織細胞，以心肌細胞和神經元等終末分化細胞含量最為豐富，可通過提高線粒體氧化還原狀態(tài)、結合Fas 死亡域相關蛋白Daxx 和Cytc、抑制caspase 級聯激活等機制抑制細胞凋亡，參與調節(jié)多種細胞的增殖、分化和細胞凋亡的信號轉導，保護細胞免受各種應激因素的損傷。近年來HSP27/HSPB1 與各種臨床疾病特別是腫瘤的關系日益受到重視。

HSP27兔單克隆抗體檢測總的HSP27的內源性水平蛋白。物種活性為人類，老鼠，大鼠。HSP27兔單克隆抗體是通過用對應于130 - 165 Hsp27周圍殘基的合成肽免疫動物而產生的。HSP27兔單克隆抗體可用于熒光激活細胞分選、免疫組化、免疫沉淀、免疫印跡。

應用

1. 在生物標記物開發(fā)中的應用

兔單克隆抗體包括HSP27兔單克隆抗體廣泛用于生命科學研究的各個領域，尤其在免疫組織化學以及檢測蛋白的轉譯后修飾方面具有獨特優(yōu)勢。至今已有100多種兔單克隆抗體開發(fā)用于癌癥的IHC臨床診斷與研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC診斷試劑盒。在蛋白修飾研究領域，如蛋白的磷酸化，在與疾病相關的蛋白質信號通路中起到了至關重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔單克隆抗體可以非常清楚地顯示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多種磷酸化特異性的兔單克隆抗體面世。

2. 在治療抗體藥物開發(fā)中的應用

臨床使用的大多數治療用抗體均需經體外親和力成熟這一步驟，以提高抗體的親和力。這一過程常需8至12個月，最終親和力在納摩爾級(10-9 mol/L)。兔單抗不需使用體外親和力成熟，就能達到10-11至10-13 mol/L。這種高親和力不僅減少抗體的臨床使用量，還能減少由于使用大量抗體帶來的副作用。但這種高親和力的優(yōu)勢還需在動物和臨床試驗中進一步證實。

另外，與鼠單抗的人源化相比，兔單克隆抗體的人源化更容易。因為，兔單克隆抗體主要由一種重鏈及輕鏈基因構成，通過分析大量的兔單克隆抗體序列發(fā)現，兔與人的抗體同源性更高，約60%～76%，而小鼠與人的抗體同源性略低，為57%～72%，說明用兔單克隆抗體開發(fā)藥物前景更廣闊。

主要參考資料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應用前景[J]. 食品與藥品，2012，14(9)： 373-376.

[2] 田方艷, 曹輝, 張培湘, 等. 小鼠 HSP27/HSPB1 單克隆抗體的制備和鑒定[J]. 腫瘤藥學, 2013 (1): 26-29.