背景[1-3]
BOVINE FIBROBLAST GROWTH FACTOR-ACIDIC牛成纖維細胞生長因子(酸是由Thomas等于1984年從牛腦中分離純化得到的，它的等電點為5-7，呈酸性，故以之命名，是第二個被分離純化的成纖維細胞生長因子家族成員，因此相對應的命名個堿性多肽為堿性成纖維細胞生長因子bFGF）。
成纖維細胞生長因子存在于機體多種組織中的一類多肽生長因子。其名稱源于它對成纖維細胞的明顯促分裂作用，主要以酸性和堿性兩種形式存在。因它對肝素有很大的親和力，故又稱為肝素結(jié)合生長因子。它除對成纖維細胞的促分裂作用外，對平滑肌、軟骨、角質(zhì)細胞和周皮細胞都有刺激增殖作用。已經(jīng)知道FGF由血管內(nèi)皮細胞合成，儲存于細胞基底膜和外基質(zhì)中。
成纖維細胞生長因子（FGFs）是由約150-200氨基酸組成的多肽，以兩種密切相關(guān)的形式存在，即堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)與酸性成纖維細胞生長因子(aFGF)。
BOVINE FIBROBLAST GROWTH FACTOR-ACIDIC牛成纖維細胞生長因子
aFGF是哺乳動物組織中存在的一種正常而微量的物質(zhì)，主要分布于腦、腎臟等器官或組織中，對來源于中胚層及神經(jīng)外胚層的多種細胞均具有促分裂作用。因其在促進胚胎發(fā)育、器官形成、血管再生、潰瘍愈合及創(chuàng)面修復等臨床應用多方面作用明顯而成為國內(nèi)外研究的熱點。
aFGF具有廣泛的生物學效應，在臨床上有重要的作用，既可用于治療燒燙傷、潰瘍、切口等創(chuàng)面愈合，又可治療機體缺血損傷、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、骨骼修復及眼晶狀體再生等多種疾病，越來越受到人們的重視。nhaFGF改構(gòu)體的研究大大拓寬了aFGF的應用范圍，使aFGF更加廣泛地應用于臨床。
aFGF廣泛的臨床應用價值使其與其他多種藥物相比展現(xiàn)出獨特的優(yōu)勢，但由于受到活體試驗和倫理學的限制，人們對aFGF多種活性的作用機制并不是十分清楚，還需要研究者通過大量的動物驗作進一步完善。今后還應繼續(xù)對aFGF的結(jié)構(gòu)組成、功能活性和信號轉(zhuǎn)導等基礎(chǔ)領(lǐng)域進行深入研究，為aFGF的實際應用提供理論基礎(chǔ)和試驗依據(jù)，以期在臨床應用中使aFGF的作用得到更大的發(fā)揮，使aFGF具有更為廣闊的應用前景。
應用[4][5]
用于VEGF、bFGF濃度梯度對豬血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞增殖移行的影響研究
利用細胞生長因子濃度梯度誘導技術(shù),探討成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞能否在生長因子濃度梯度誘導下快速地由低濃度向高濃度增殖移行,為加速慢性創(chuàng)面的修復提供一定的理論基礎(chǔ)。
方法1.體外培養(yǎng)豬血管內(nèi)皮細胞和成纖維細胞。
2. 用MTT法及細胞劃痕實驗檢測不同濃度VEGF對血管內(nèi)皮細胞增殖和移行的影響及不同濃度b FGF對成纖維細胞增殖和移行的影響。
3. 以浸泡法將VEGF和b FGF分別加載于膠原支架,用ELISA法通過標準曲線計算VEGF和b FGF于膠原支架的結(jié)合率和緩釋性。
4. 篩選出在各時間點增殖和移行活性均有差異的不同濃度的VEGF或b FGF加載于膠原支架構(gòu)成濃度梯度。
5. 血管內(nèi)皮細胞與加載VEGF濃度梯度的圓形膠原支架共同培養(yǎng),通過MTT法和測量細胞距中心點距離的差值檢測血管內(nèi)皮細胞增殖和遷移活力.
6. 成纖維細胞與加載b FGF濃度梯度的圓形膠原支架共同培養(yǎng),通過MTT法和測量細胞距中心點距離的差值檢測成纖維細胞增殖和遷移活力。
結(jié)果1.在不同濃度VEGF刺激下,血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移活性均受到影響,對兩組數(shù)據(jù)分別進行單因素方差分析,篩選出5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml三組,三組組間在各時間點增殖和遷移活力都有顯著差異（P<0.05）。
2. 在不同濃度b FGF刺激下,成纖維細胞的增殖和遷移活性均受到影響,對兩組數(shù)據(jù)分別進行單因素方差分析,篩選出10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml三組,三組組間在各時間點增殖和遷移活力都有顯著差異（P<0.05）。
3. VEGF與膠原支架結(jié)合率為42.35%,b FGF與膠原膜片結(jié)合率為38.23%,且有一定的緩釋性。
4. VEGF濃度梯度組（5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml）與VEGF單一濃度組相比較,對血管內(nèi)皮細胞的增殖活性沒有顯著影響,而對血管內(nèi)皮細胞的遷移活性有顯著影響（P<0.05）。
5.b FGF濃度梯度組（10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml）與b FGF單一濃度組相比較,對成纖維細胞的增殖活性沒有顯著影響,而對成纖維細胞的遷移活性有顯著影響（P<0.05）。
參考文獻
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[2]Acceleration of diabetic wound healing by collagen-binding vascular endothelial growth factor in diabetic rat model[J].Xin Yan,Bing Chen,Yue Lin,Yunjian Li,Zhifeng Xiao,Xianglin Hou,Qian Tan,Jianwu Dai.Diabetes Research and Clinical Practice.2010(1)
[3]Accelerated wound closure of pressure ulcers in aged mice by chitosan scaffolds with and without bFGF[J].Chan J.Park,Sherrie G.Clark,Carol A.Lichtensteiger,Russell D.Jamison,Amy J.Wagoner Johnson.Acta Biomaterialia.2009(6)
[4]Preincubation With bFGF but Not Sodium Ascorbate Improves Efficiency of Autologous Transplantation of Muscle-derived Cells Into Urethral Wall[J].Anna Burdzińska,Urszula Bartoszuk,Arkadiusz Orzechowski.Urology.2009(4)
[5]呂經(jīng)緯.VEGF、bFGF濃度梯度對豬血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞增殖移行的影響[D].南京醫(yī)科大學,2015.