制備^[1]

小鼠IgG(immunoglobulin G)蛋白的制備：用純化的基因工程抗原HIV-p24 免疫雌性 6 周齡BALB/C小鼠，每只小鼠免疫30μg 抗原，在四肢的淋巴結(jié)附近皮下多點注射，每間隔30d 免疫1 次，共3 次。第 1次與完全弗氏佐劑混合免疫，后兩次與不完全福氏佐劑混合免疫。融合前3d 加強免疫1 次。用小鼠骨髓瘤SP2/0 細胞和免疫小鼠的脾細胞按常規(guī) PEG 方法融合，有限稀釋法克隆細胞，間接 ELISA 法篩選特異性抗體，陽性細胞連續(xù)克隆4次，直到抗體分泌陽性率達到 100%，確定為穩(wěn)定的細胞株。間接 ELISA 法檢測單抗細胞上清。將抗 HIV-p24 單抗細胞注射小鼠的腹腔，制備腹水。收獲的腹水用50%飽和硫酸銨沉淀 1 次，再用30%飽和硫酸銨沉淀兩次，沉淀蛋白溶于 pH=7.4 的 PBS 液中，進一步用 DEAE52離子交換純化，調(diào)pH值為7.0，用紫外分光光度計測定抗體蛋白濃度，蛋白貯存液為1mg/mL。

不同小鼠 Ig G對丙型肝炎病毒核心抗原酶聯(lián)免疫法檢測的影響^[2]

 不同廠家小鼠 Ig G分別配制成不同的抗 HCV-cAg酶結(jié)合物溶液，酶標(biāo)法測定。結(jié)果見表 1。雖然每一廠家的標(biāo)示濃度均>95% ，但由于制備方法、雜質(zhì)含量、蛋白純度不同等各種因素的影響，其檢測結(jié)果不同。不同廠家小鼠 Ig G分別配制成不同的抗 HCV-cAg酶結(jié)合物溶液，破壞實驗后用酶標(biāo)法測定結(jié)果見表2。由于重金屬雜質(zhì)含量、小鼠 IgG與抗原結(jié)合程度不一致等各種因素的影響，其穩(wěn)定性檢測結(jié)果會有不同。

主要參考資料

[1]徐宗偉,房豐洲,趙鐵強,董申.碳納米管探針對小鼠IgG蛋白的納米表征[J].天津大學(xué)學(xué)報,2009,42(10):919-922.

[2]劉群奇,張桂平,胡道奇.不同小鼠IgG對丙型肝炎病毒核心抗原酶聯(lián)免疫法檢測的影響[J].臨床輸血與檢驗,2011,13(04):324-325.