技術(shù)背景

川楝子為楝科植物川楝（Melia toosendan Sied. Et Zucc.)的成熟果實(shí)，是一味 傳統(tǒng)中藥，功能舒肝行氣、止痛、驅(qū)蟲，用于胸脅、脘腹脹痛，疝痛，蟲積腹痛等證有近二千年 的用藥歷史，為中國(guó)歷版藥典收載。現(xiàn)代研究結(jié)果表明，川楝子提取物具有抗菌、抗病毒、抗 炎、鎮(zhèn)痛、殺蟲等多種藥理活性。檸檬苦素類成分是楝屬（Melia)植物中的主要藥理活性成 分，該類成分為多氧取代的復(fù)雜三萜類成分，母核結(jié)構(gòu)多變，不同植物品種和同一植物不同 部位之間均存在較大差別。近年來(lái)，通過(guò)對(duì)川楝子的化學(xué)成分進(jìn)行了系列研究，從中發(fā)現(xiàn)了 一些特征性的尼泊里寧（nimbolinin)型檸檬苦素類成分，參見(jiàn)通式（1)。其主要結(jié)構(gòu)特征 在于C環(huán)裂環(huán)、12-15位碳原子間形成新的氧環(huán)，同時(shí)12位碳為縮醛結(jié)構(gòu)，常以互變異構(gòu)體 形式存在。該類成分除川楝子外，主要只在苦楝子和非洲同屬植物Melia volkensin果實(shí) 中發(fā)現(xiàn)，具有較強(qiáng)的科屬和部位特異性。2007年以前報(bào)道化合物總計(jì)13個(gè)，見(jiàn)表1。

表1尼泊里寧型檸檬苦素類化合物及其來(lái)源

近年來(lái)對(duì)尼泊里寧類等成分的新進(jìn)展，拓寬了人們對(duì)川楝子中化學(xué)成分的認(rèn)識(shí)。 但對(duì)川楝子藥理活性與化學(xué)成分的相關(guān)性，仍有待于進(jìn)一步研究。

本發(fā)明通過(guò)對(duì)川楝子的三萜類化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行研究，在此基礎(chǔ)上制定出 成分基本明確可控的川楝子提取物，從而完成本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種有效成分可控的川楝子提取物。

本發(fā)明的又一目的是提供一種所述川楝子提取物的制備工藝，及其在醫(yī)藥領(lǐng)域和 農(nóng)藥中的用途。

本發(fā)明提供的川楝子提取物含有通式（1)所示檸檬苦素類成分：

其中，札和R2可為Η或R3, R3為選自Ac、Bz、Cin、Tig的任意一種酯基。

本發(fā)明所述川楝子提取物中含有新化合物成分川楝里寧況=R2= Tig)。

又一方面，本發(fā)明所述川楝子提取物中含有尼泊里寧A(Ri= Ac，R2= Bz，R3= Η)、 尼泊里寧 13(1^= Ac，R2= Tig，R3= Η)、1-去乙酰基尼泊里寧 B(R Η，R2= Tig，R3= Η) 中的任意一種以上。

本發(fā)明提供的制備所述川楝子提取物的方法包括以下步驟：

(1)選取川楝子藥材，采用水或醇-水混合溶劑進(jìn)行提取，提取液合并，濃縮，得川 楝子浸膏；過(guò)濾，得粗提取液；

(2)由（1)所得川楝子浸膏分散于水中，用與水不混溶的有機(jī)溶劑萃取3-5次，萃 取液合并濃縮，干燥，即得所述川楝子提取物。

所述工藝步驟（1)中，所述提取溶劑優(yōu)選為乙醇-水混合溶劑，其中優(yōu)選60-95% 乙醇。牡丹科植物為白芍、赤芍、牡丹中的任意一種，所述提取方法可為回流提取、超聲提 取、微波輔助提取、逆流提取中的任意一種。

所述工藝步驟（2)中，所述有機(jī)溶劑為石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯中的任 意一種或任意二種的混合溶劑，其中優(yōu)選乙酸乙酯或石油醚-乙酸乙酯混合溶劑。

本發(fā)明同時(shí)對(duì)該提取物的抗腫瘤、抗炎作用進(jìn)行了考察。研究結(jié)果：（1)采用MTT 法，對(duì)川楝子提取物和四個(gè)尼泊里寧類化合物進(jìn)行了抗肝癌腫瘤細(xì)胞活性篩選，結(jié)果顯示 川楝子提取物和四個(gè)化合物1-4對(duì)肝癌細(xì)胞（HepG-2)均有顯著抑制作用；2)二甲苯致小 鼠急性耳腫脹試驗(yàn)結(jié)果表明，所述川楝子提取物組灌藥給藥（50-200mg/kg)具有顯著的抗 炎作用。結(jié)果表明，所述川楝子提取物具有較好的抗腫瘤和抗炎活性，四個(gè)尼泊里寧類化合 物是該提取物的主要有效成分之一，所述提取物可以根據(jù)使用需要應(yīng)用于相關(guān)的藥品和農(nóng)藥中。

本發(fā)明通過(guò)川楝子的化學(xué)成分研究，創(chuàng)新性地發(fā)現(xiàn)了其中的1個(gè)新尼泊里寧類化 合物和其他主要的三個(gè)同類成分，并初步驗(yàn)證了該類成份在抗腫瘤、抗炎方面對(duì)川楝子藥 理作用的貢獻(xiàn)；在此基礎(chǔ)上建立了川楝子提取物的制備工藝，所述工藝路線經(jīng)濟(jì)合理、效率 高、能耗低，溶劑便于回收和循環(huán)利用，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明內(nèi)容是通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究和工藝優(yōu)化完成的，以下述具體實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明。

川楝子提取物的制備

本發(fā)明所述的川楝子提取物是按以下實(shí)施例所表示的方法制造，所涉及到的方法 是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠掌握和運(yùn)用的技術(shù)手段。但以下實(shí)施例不得理解為任何意義上的對(duì)本領(lǐng)域發(fā)明權(quán)利要求的限制。

取川楝子藥材4kg，粉碎成粗粉，用50L 75%乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收溶劑，得川楝子浸膏550g，用4L水分散，用乙酸乙酯振搖萃取4次，每次 4L，乙酸乙酯萃取液合并，減壓回收溶劑，得川楝子提取物（180g)。