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磷酸化上皮鈉通Β抗體的應用

2021/2/25 11:24:53

背景[1-3]

磷酸化上皮鈉通Β抗體是可以特異性結合磷酸化上皮鈉通Β蛋白的一類多克隆抗體,主要用于磷酸化上皮鈉通Β蛋白的體外檢測實驗。

磷酸化上皮鈉通ΒELISA檢測示意圖

鈉離子通道是由內在膜蛋白形成的離子通道,可以讓鈉離子Na通過細胞膜。鈉離子通道可以依啟動的方式加以分類,一種是依電壓變化而啟動的(電壓門控型),另一種則是需和其他化學物質(配體)結合后才啟動的(配體門控型)。

上皮鈉通道(ENaC)是可滲透Na+離子的膜離子通道。它位于腎臟,肺,結腸和其他組織的上皮的頂質膜中,在反式上皮Na+離子轉運中發(fā)揮作用。具體而言,通過ENaC的Na+轉運發(fā)生在許多上皮表面,并且在調節(jié)鹽和水的吸收中起關鍵作用。

ENaC由三個結構相關的亞基組成,形成一個四聚體通道A,B和γ。隨著角質形成細胞的分化,其A和B亞基的表達得以增強。B和γ-ENaC亞基對于浮腫液發(fā)揮其作用,對遠端肺上皮的凈液吸收發(fā)揮作用。并且已經得出結論,這些亞基在高眼壓小鼠的視網膜中差異表達,因此,A-ENaC蛋白的上調可以作為針對眼內壓升高的保護機制。

應用[4][5]

用于腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉運體的表達研究

腎臟維持機體水鹽代謝、酸堿平衡以及內環(huán)境穩(wěn)態(tài)主要是通過上皮鈉通道(ENaC)、鈉鉀氯共轉運體(NKCC2)和水通道蛋白(AQP2)對水鹽代謝的調控來實現的。

為研究慢性腎功能衰竭過程中這些蛋白的變化,本實驗通過建立腺嘌呤誘導的慢性腎功能衰竭大鼠模型,應用形態(tài)學觀察、血尿生化檢測、免疫組織化學染色、RT-PCR和Werstern blotting等方法,觀察腎臟形態(tài)學及各生化指標的變化,腎臟主要的鈉通道NKCC2、γ-ENaC以及水通道AQP2 mRNA及蛋白水平的變化,以及NKCC2、γ-ENaC在細胞定位的改變,研究NKCC2和γ-ENaC在慢性腎功能衰竭中所起的作用和其調節(jié)機制。研究結果顯示,慢性腎功能衰竭時出現多尿,以及電解質紊亂,腎小管上皮細胞NKCC2、AQP2 mRNA及蛋白水平降低,而γ-ENaCmRNA表達增多,蛋白水平卻表現出下降趨勢,并與功能學指標相關。

研究結果提示:慢性腎功能衰竭是由代償向失代償過度的漸進過程,腺嘌呤所致大鼠腎衰腎小管重吸收障礙先于腎小球濾過障礙。大鼠慢性腎功能衰竭時,NKCC2、γ-ENaC蛋白水平降低是導致尿量增多及血鈉降低的主要原因之一。

參考文獻

[1]Effects of inhibition of the Na+-K+-2C1 cotransporter on myogenic and angiotensin II responses of the rat afferent arteriole.Wang X,Breaks J,Loutzenhiser K,Loutzenhiser R.American Journal of Physiology Renal Physiology.2007

[2]Vasopressin increases Na-K-2C1 cotransporter expression in thick ascending limb of Henle’s loop.Kim GH,Ecelbarger CA,Mitchell C,Packer RK,Wade JB,Knepper MA.American Journal of Physiology.1999

[3]Mechanism of vasopressin action in the renal collecting duct.Knepper MA,Nielsen S,Chou CL,et al.Seminars in Nephrology.1994

[4]NHE3:A Na+/H+exchanger isoform of renal brush border.Biemesderfer D,Pizzonia J,Abu-Alfa A,Exner M,Reilly R,Igarashi P,Aronson PS.American Journal of Physiology.1993

[5]程潤芬.腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉運體的表達[D].吉林大學,2009.

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