背景[1-3]
磷酸化上皮鈉通Β抗體是可以特異性結(jié)合磷酸化上皮鈉通Β蛋白的一類(lèi)多克隆抗體，主要用于磷酸化上皮鈉通Β蛋白的體外檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
磷酸化上皮鈉通ΒELISA檢測(cè)示意圖
鈉離子通道是由內(nèi)在膜蛋白形成的離子通道，可以讓鈉離子Na通過(guò)細(xì)胞膜。鈉離子通道可以依啟動(dòng)的方式加以分類(lèi)，一種是依電壓變化而啟動(dòng)的（電壓門(mén)控型），另一種則是需和其他化學(xué)物質(zhì)（配體）結(jié)合后才啟動(dòng)的（配體門(mén)控型）。
上皮鈉通道（ENaC）是可滲透Na+離子的膜離子通道。它位于腎臟，肺，結(jié)腸和其他組織的上皮的頂質(zhì)膜中，在反式上皮Na+離子轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮作用。具體而言，通過(guò)ENaC的Na+轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生在許多上皮表面，并且在調(diào)節(jié)鹽和水的吸收中起關(guān)鍵作用。
ENaC由三個(gè)結(jié)構(gòu)相關(guān)的亞基組成，形成一個(gè)四聚體通道A，B和γ。隨著角質(zhì)形成細(xì)胞的分化，其A和B亞基的表達(dá)得以增強(qiáng)。B和γ-ENaC亞基對(duì)于浮腫液發(fā)揮其作用，對(duì)遠(yuǎn)端肺上皮的凈液吸收發(fā)揮作用。并且已經(jīng)得出結(jié)論，這些亞基在高眼壓小鼠的視網(wǎng)膜中差異表達(dá)，因此，A-ENaC蛋白的上調(diào)可以作為針對(duì)眼內(nèi)壓升高的保護(hù)機(jī)制。
應(yīng)用[4][5]
用于腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時(shí)腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)研究
腎臟維持機(jī)體水鹽代謝、酸堿平衡以及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)主要是通過(guò)上皮鈉通道（ENaC）、鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運(yùn)體（NKCC2）和水通道蛋白（AQP2）對(duì)水鹽代謝的調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
為研究慢性腎功能衰竭過(guò)程中這些蛋白的變化,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立腺嘌呤誘導(dǎo)的慢性腎功能衰竭大鼠模型,應(yīng)用形態(tài)學(xué)觀察、血尿生化檢測(cè)、免疫組織化學(xué)染色、RT-PCR和Werstern blotting等方法,觀察腎臟形態(tài)學(xué)及各生化指標(biāo)的變化,腎臟主要的鈉通道NKCC2、γ-ENaC以及水通道AQP2 mRNA及蛋白水平的變化,以及NKCC2、γ-ENaC在細(xì)胞定位的改變,研究NKCC2和γ-ENaC在慢性腎功能衰竭中所起的作用和其調(diào)節(jié)機(jī)制。研究結(jié)果顯示,慢性腎功能衰竭時(shí)出現(xiàn)多尿,以及電解質(zhì)紊亂,腎小管上皮細(xì)胞NKCC2、AQP2 mRNA及蛋白水平降低,而γ-ENaCmRNA表達(dá)增多,蛋白水平卻表現(xiàn)出下降趨勢(shì),并與功能學(xué)指標(biāo)相關(guān)。
研究結(jié)果提示:慢性腎功能衰竭是由代償向失代償過(guò)度的漸進(jìn)過(guò)程,腺嘌呤所致大鼠腎衰腎小管重吸收障礙先于腎小球?yàn)V過(guò)障礙。大鼠慢性腎功能衰竭時(shí),NKCC2、γ-ENaC蛋白水平降低是導(dǎo)致尿量增多及血鈉降低的主要原因之一。
參考文獻(xiàn)
[1]Effects of inhibition of the Na+-K+-2C1 cotransporter on myogenic and angiotensin II responses of the rat afferent arteriole.Wang X,Breaks J,Loutzenhiser K,Loutzenhiser R.American Journal of Physiology Renal Physiology.2007
[2]Vasopressin increases Na-K-2C1 cotransporter expression in thick ascending limb of Henle’s loop.Kim GH,Ecelbarger CA,Mitchell C,Packer RK,Wade JB,Knepper MA.American Journal of Physiology.1999
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[5]程潤(rùn)芬.腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時(shí)腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)[D].吉林大學(xué),2009.