背景[1-3]
9號培養(yǎng)基用于多粘菌素B等抗生素效價測定的底層培養(yǎng)基，成分(g/L)：胰酶消化酪蛋白胨17.0；大豆粉木瓜酶消化物3.0；氯化鈉5.0；磷酸氫二鉀2.5；葡萄糖2.5；Agar/瓊脂20.0；pH值7.2±0.1 25℃。
用法：稱取本品50.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。
硫酸多粘菌素B(多粘菌素B)多粘菌素系由多粘芽胞桿菌（bacilluspolymyxa）產(chǎn)生的一組多肽類抗生素。多粘菌素b和e供藥用。常用其硫酸鹽，為白色結(jié)晶性粉末，易溶于水，有引濕性。在酸性溶液中穩(wěn)定，其中性溶液在室溫放置一周不影響效價，堿性溶液不穩(wěn)定。
多粘菌素B抗菌譜及臨床應用與多粘菌素E相似，對革蘭陰性桿菌，如大腸桿菌、綠膿桿菌、副大腸桿菌、肺炎克雷白桿菌、嗜酸桿菌、百日咳桿菌及痢疾桿菌等有抑制或殺菌作用。臨床上主要用于敏感菌引起的感染及綠膿桿菌引起的泌尿系統(tǒng)感染、以及眼、氣管、腦膜炎、敗血癥、燒傷感染以及皮膚粘膜感染等。
多粘菌素B對綠膿桿菌、大腸桿菌、肺炎克雷白桿菌，以及嗜血桿菌、腸桿菌屬、沙門菌、志賀菌、百日咳桿菌、巴斯德菌和弧菌等革蘭陰性菌有抗菌作用。變形桿菌、奈瑟菌、沙雷菌、普魯威登菌、革蘭陽性菌和專性厭氧菌均對本類藥物不敏感。細菌對本品與多粘菌素E之間有交叉耐藥性，但對本類藥物與他類抗菌藥物間則沒有交叉耐藥性發(fā)現(xiàn)。
應用[4][5]
用于多重耐藥鮑曼不動桿菌對多粘菌素B的耐藥機制研究
測臨床分離鮑曼不動桿菌中攜帶的β-內(nèi)酰胺酶基因及外排泵基因,體外誘導鮑曼不動桿菌對多粘菌素B產(chǎn)生耐藥,以探討其對多粘菌素B的耐藥機制。
方法:1、連續(xù)收集臨床分離的63株非重復多重耐藥鮑曼不動桿菌,采用微量肉湯稀釋法測定亞胺培南、美羅培南、頭孢他啶、頭孢吡肟、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、阿米卡星、多粘菌素B及頭孢哌酮舒巴坦的最低抑菌濃度（MICs）。
2、采用腸桿菌科基因間重復序列-聚合酶鏈反應（ERIC-PCR）獲得63株鮑曼不動桿菌的指紋圖譜并進行同源性分析。
3、采用聚合酶鏈反應（PCR）檢測β-內(nèi)酰胺酶基因TEM、AmpC、OXA-23、KPC、IMP、VIM,外排泵基因adeB、adeG、adeJ、adeR、adeS,兩組份調(diào)節(jié)系統(tǒng)基因pmrA、pmr B。
4、采用體外實驗對收集的菌株進行誘導耐藥,以獲得多粘菌素B耐藥的鮑曼不動桿菌。
5、采用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（RT-qPCR）檢測誘導耐藥菌株及原始敏感菌株的外排泵基因adeB、adeJ、adeG及兩組份調(diào)節(jié)系統(tǒng)基因pmrA、pmr B的m RNA表達情況,分析其表達差異。
6、對負責脂質(zhì)A生物合成的基因lpxA/lpxC/lpxD及兩組份調(diào)節(jié)系統(tǒng)基因pmr A、pmrB進行PCR擴增并將擴增產(chǎn)物測序,探討耐藥菌株是否發(fā)生特異性突變。
7.采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）對誘導耐藥的菌株及原始敏感菌株進行檢測,分析其蛋白質(zhì)差異。
參考文獻
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[2]The difference in medical costs between carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii and non-resistant groups:a case study from a hospital in Zhejiang province,China[J].X.Zhen,Y.Chen,X.Hu,P.Dong,S.Gu,Y.Y.Sheng,H.Dong.European Journal of Clinical Microbiology&Infec.2017(10)
[3]Resistance to polymyxins in Gram-negative organisms[J].Katy Jeannot,Arnaud Bolard,Patrick Plésiat.International Journal of Antimicrobial Agents.2017(5)
[4]Fosfomycin resistance in Acinetobacter baumannii is mediated by efflux through a major facilitator superfamily(MFS)transporter—AbaF[J].Atin Sharma,Rajnikant Sharma,Tapas Bhattacharyya,Timsy Bhando,Ranjana Pathania.Journal of Antimicrobial Chemotherapy.2017(1)
[5]劉戀.多重耐藥鮑曼不動桿菌對多粘菌素B的耐藥機制研究[D].西南醫(yī)科大學,2018.