背景[1-3]
兔骨髓間充質(zhì)干細胞完全培養(yǎng)基特別添加了能有效改善細胞生長狀態(tài)的營養(yǎng)物質(zhì)和特別甄選的優(yōu)質(zhì)胎牛血清，適合兔骨髓間質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)。
基礎培養(yǎng)基只能維持細胞生存，要想使細胞生長和繁殖，還需添加天然培養(yǎng)基，常用的是牛血清，因為牛血清中含有促細胞增殖的各種生長因子（Growth Factor）和其它多種有利于細胞生存的物質(zhì)。此外，為防止污染，培養(yǎng)液中尚需加一定量的抗生素。完全培養(yǎng)基根據(jù)添加血清量的多少，可分為細胞生長培養(yǎng)基和細胞維持培養(yǎng)基，用于不同細胞和不同研究。
間充質(zhì)干細胞是一種多能干細胞，它具有干細胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。在臨床應用也最多，與造血干細胞聯(lián)合應用，可以提高移植的成功率，加速造血重建。當患者接受大劑量化療后，將間充質(zhì)干細胞與造血干細胞一同輸入，可明顯加速患者血細胞恢復時間，且安全無不良反應。
間充質(zhì)干細胞不僅存在于骨髓中，也存在于骨骼肌、骨外膜和骨小梁中。由于它分化的組織類型十分廣泛，因此臨床應用價值不菲。
骨髓原始間充質(zhì)干細胞是骨髓基質(zhì)干細胞，是人們在哺乳動物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細胞的多種分化潛能的細胞亞群。它們對骨髓中的造血干細胞（HSC）不僅有機械支持作用，還能分泌多種生長因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來支持造血。
應用[4][5]
用于兔骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)、凍存及體外分化為胰島β細胞的研究
在體外分離培養(yǎng)兔BM-MSCs的基礎上，對凍存細胞的增殖能力、生物學特性進行鑒定，優(yōu)化并建立穩(wěn)定的兔BM-MSCs體外定向分化為胰島β細胞的誘導方法與技術體系。
1. 采用紅細胞裂解液法分離獲取兔骨髓間充質(zhì)干細胞（BM-MSCs），基于其貼附塑料基質(zhì)細胞培養(yǎng)板生長的特性體外擴增培養(yǎng)。通過觀察形態(tài)學，鑒定細胞表面標志，描繪生長曲線等了解兔BM-MSCs生物學特性。
紅細胞裂解液法操作簡便、便于復制，能夠分離獲得高純度的兔BM-MSCs，細胞生物學特性穩(wěn)定，增殖活性好。
2. 選取P1，P3，P9代細胞進行凍存復蘇，臺盼藍染色檢測細胞復蘇率，觀察凍存時間（15d，30d，90d）對各代（P1，P3，P9代）細胞復蘇效果的影響；鑒定凍存細胞的增殖及生物學特性，向脂肪細胞誘導分化驗證其干細胞多潛能分化特性。結果表明凍存復蘇的兔BM-MSCs可繼續(xù)培養(yǎng)傳代，但其傳代次數(shù)有限；仍然具有多潛能干細胞特性，可以分化為脂肪細胞。
凍存的兔BM-MSCs生物學性狀相對穩(wěn)定，同樣可以應用于組織工程、細胞移植和基因治療等方面，為解決BM-MSCs的儲備、節(jié)省材料和時間提供依據(jù)。
3.利用DNA甲基化酶抑制劑(5-Aza-dC)，探討甲基化程度降低是否可以增強胰島特異基因PDX-1的表達，進而促進胰島細胞分化和β細胞的成熟。
參考文獻
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[3]Increased DNA Methylation and Decreased Expression of PDX-1 in Pancreatic Islets from Patients with Type 2 Diabetes[J].Molecular Endocrinology.2012(7)
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[5]許曉婷.兔骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)、凍存及體外分化為胰島β細胞的研究[D].河南農(nóng)業(yè)大學,2014.