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Pepro Grow-hESC Embryonic Stem Cell Media的應(yīng)用舉例

2020/10/21 10:31:51

背景及概述[1]

Pepro Grow-hESC Embryonic Stem Cell Media是人胚胎干細(xì)胞(hESC)和人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSC)的維持培養(yǎng)基,是化學(xué)成分明確的完全培養(yǎng)基,不含血清和酚紅,專門(mén)用于人類胚胎干細(xì)胞 (hESCs)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSCs)的無(wú)飼養(yǎng)層維持培養(yǎng)和擴(kuò)增(需以BD MatrigelTM作為表面包被基質(zhì))。該培養(yǎng)基可保持hESCs和hiPSCs的未分化、多能狀態(tài)(SSEA4+/Oct4+),流式細(xì)胞術(shù)分析顯示自發(fā)分化的細(xì)胞比例低于15%。該培養(yǎng)基的獨(dú)特配方中含有FGF2(堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)等生長(zhǎng)因子,但不含胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基中存在的胰島素。PeproGrow-hESC胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基由美國(guó)PeproTech公司和美國(guó)Rutgers(羅格斯)大學(xué)干細(xì)胞培訓(xùn)中心合作設(shè)計(jì)與研發(fā),包含一瓶100mL或500mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基和一管單獨(dú)的重組生長(zhǎng)因子凍干粉。

應(yīng)用[1]

PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media可用于H1人類胚胎干細(xì)胞的生長(zhǎng):H1人類胚胎干細(xì)胞(hESC)在PeproGrow-hESC胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng), Dispase酶消化傳代,并用含2μ M Y-27632(Rho激酶抑制劑)的PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media鋪板于包被有BD MatrigelTM的6孔板中。每天換液, 并分別在傳代后24,48和72小時(shí)拍照。該hESC經(jīng)慢病毒(Lentivirus)感染改造,使得其含有Oct4啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)的turboGFP熒光蛋白基因,因此圖中綠色熒光為Oct4啟動(dòng)子發(fā)揮活性所致,提示細(xì)胞保持著多能性。與競(jìng)爭(zhēng)公司的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基相似,PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media可很好地維持干細(xì)胞的多能狀態(tài),但PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media培養(yǎng)的細(xì)胞鋪板效果更好,可更快地融合。

參考文獻(xiàn)

[1] PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media使用說(shuō)明

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